[发明专利]一种抗心磷脂抗体IgG磁微粒化学发光免疫检测试剂盒

说明书

本发明涉及医学检验技术领域，特别涉及一种抗心磷脂抗体IgG磁微粒化学发光免疫检测试剂盒。该试剂盒包括磁微粒混悬液、酶结合物试剂、样本稀释液试剂和校准品；磁微粒混悬液由磁微粒‑链霉亲和素复合物和磁微粒缓冲液组成；酶结合物试剂由化学发光标记物标记的抗人IgG抗体和酶结合物稀释液组成；样本稀释液试剂由生物素化心磷脂抗原溶液和样本稀释液组成；生物素化心磷脂抗原溶液为生物素化的β2‑GP1抗原‑心磷脂抗原溶液。本发明试剂盒采用生物素间接标记心磷脂抗原，可解决漏检的难题，且检测方法简单、有效，可全自动操作，单人份测试，且试剂盒具备较佳的灵敏度、准确度、精密度和稳定性。

技术领域

本发明涉及医学检验技术领域，特别涉及一种抗心磷脂抗体IgG磁微粒化学发光免疫检测试剂盒。

背景技术

抗磷脂综合征(antiphospholipid syndrome，APS)是一种由抗磷脂抗体(antiphospholipid-antibody,APL)介导的非器官特异的自身免疫病，临床上以动脉、静脉血栓形成、病态妊娠(妊娠早期流产和中晚期死胎)和血小板减少等症状为主要表现，同时伴随中、高滴度APLs阳性。抗磷脂抗体(APL)是一组以磷脂或磷脂结合蛋白为靶抗原的自身抗体总称。APLs通过识别并结合相关磷脂或磷脂结合蛋白来干扰各种依赖磷脂的凝血过程，如：影响血管内皮细胞和血小板功能，促进磷脂依赖性凝血过程的发生，抑制抗凝物质的作用(如β2-GP1、凝血酶原、蛋白C、蛋白S、继发性抗凝血酶Ⅲ)，与胎盘抗凝蛋白结合，导致胎盘血栓形成及自发流产等。

抗心磷脂抗体(anticardiolipinantibodies,aCL)是一种以血小板和内皮细胞膜上带负电荷的心磷脂作为靶抗原的自身抗体。为抗磷脂抗体的一种，也是抗磷脂抗体综合征(APS)的标志性抗体。抗心磷脂抗体的存在被认为是机体自身免疫反应的有力证据。aCL是一组特性不同的非均一性抗体，可分为IgG、IgM、IgA三种亚型。根据临床病症不同又可分为两类：一类是非β2-GP1依赖型抗体，多见于感染性疾病；一类是β2-GP1依赖型抗体，多见于自身免疫性疾病。在2006年修订的札幌标准中，实验室阳性指标之一为IgG/M类抗心磷脂抗体阳性(滴度99的百分位数)。此外，在第十三届国际共识中，诊断APS推荐测定心磷脂抗体的IgG和IgM亚型，当两者都为阴性，但仍然怀疑是APS患者时，推荐测定心磷脂抗体的IgA亚型。

临床上检测抗心磷脂抗体的方法主要为酶联免疫吸附法(ELISA)和磁微粒化学发光法(CLIA)。其技术原理如下：

将心磷脂抗原(cL)，包被到96孔酶联板或者磁微粒上，加入样本，样本中的抗心磷脂抗体IgG(aCL-IgG)与孔内的心磷脂抗原(cL)发生特异性反应，使用清洗液洗去游离物质，之后加入辣根过氧化物酶(HRP)/碱性磷酸酶(AP)或者吖啶酯(标记的兔/羊或者鼠抗人IgG抗体，形成心磷脂抗原-抗心磷脂抗体IgG-标记后的抗人IgG抗体的复合物，再次使用清洗液洗去游离物质，加入底物，底物被催化或者直接发光，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据吸光或者发光值来进行定性或定量分析。

酶联免疫吸附法(ELISA)存在着下述的不足之处：

(1)使用12×8型、6×8型、8×12型或整板型96孔专用微孔板作为抗原包被用具和反应容器，在使用时只能分成12批次、6批次、8批次或整板一次使用，无法进行独立的、单人份的检测；

(2)定量测定所用的试剂种类较多，每一种检测试剂都要用试剂瓶来盛装，并且每使用一种试剂时都需要更换吸液嘴来分别加注到微孔板的微孔中，不但试剂瓶种类多，加注试剂的操作也极为繁琐；

(3)缺少对检测信息的相应标注，只能通过查看试剂盒外包装盒的标识才能了解或知悉检测试剂的生产批号及有效期信息，而且所知悉的信息在检测过程中不受控，具有很大的随意性；

(4)检测试剂在检测过程中处于开放的空间，容易引起各种试剂之间的交叉污染而影响检测结果的准确性；