[发明专利]新型冠状病毒N基因核酸检测试剂盒

说明书

本发明提供了新型冠状病毒N基因核酸检测试剂盒，具体的地，本发明公开了一种检测新型冠状病毒2019‑nCoV的N基因核酸的试剂盒及方法，具有极高的灵敏度和特异性。

技术领域

本发明属于生物技术和分子诊断领域，具体地说，本发明涉及新型冠状病毒2019-nCoV N基因核酸检测试剂盒。

背景技术

2019年12月以来，陆续发现了多例不明原因肺炎病例，现已证实为一种新型冠状病毒感染引起的急性呼吸道传染病。基于目前的流行病学调查，潜伏期一般为3-7天，最长不超过14天。此次疫情临床表现以发热、乏力、干咳为主要表现。少数患者伴有鼻塞、流涕、腹泻等症状。部分患者仅表现为低热、轻微乏力等，无肺炎表现，多在1周后恢复。世界卫生组织将本次引起病毒性肺炎病例的病原体命名为2019新型冠状病毒，即“2019-nCoV”。

新型冠状病毒（2019-nCoV）属于β属的新型冠状病毒，有包膜，颗粒呈圆形或椭圆形，常为多形性，直径60-140nm，是目前已知的可以感染人的第7种冠状病毒，其余6种冠状病毒分别是HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、SARS-CoV和MERS-CoV。其中前4种在人群中较为常见，致病性较低，一般仅引起类似普通感冒的轻微呼吸道症状；另外2种是SARS冠状病毒和MERS冠状病毒（中东呼吸综合症冠状病毒）。

目前传统的分离培养法培养检测2019新型冠状病毒耗电时长、成本高，未能形成快速、完整的2019新型冠状病毒检测体系。

因此，针对新型冠状病毒（2019-nCoV）有必要开发快速、灵敏、使用便捷的检测体系，以满足临床需要。

发明内容

本发明针对新型冠状病毒基因组N基因开发了新型冠状病毒诊断体系，能够高效率、高特异性、低成本的对新型冠状病毒2019-nCoV感染患者进行检测。

在本发明的第一方面，提供了一种用于检测新型冠状病毒2019-nCoV核酸的引物对集，所述引物对集包括：

第一引物对组，所述第一引物对组包括：

如SEQ ID NO.1所示的正向引物；和，如SEQ ID NO.2所示的反向引物。

在另一优选例中，所述引物对集还包括：

内标引物对组，所述内标引物对组包括：

如SEQ ID NO.4所示的正向引物；和，如SEQ ID NO.5所示的反向引物。

本发明的第二方面，提供了一种多重检测新型冠状病毒2019-nCoV核酸的探针组，所述探针组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的第一探针。

在另一优选例中，所述探针组还包括核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示的内控探针。

在另一优选例中，各探针的5’端包含有荧光报告基团；和/或，各探针的3’端包含有荧光淬灭基团。

在另一优选例中，各探针标记的荧光报告基团互不相同。

本发明的第三方面，提供了一种用于多重检测新型冠状病毒2019-nCoV核酸的试剂盒，所述试剂盒包括本发明第一方面所述的引物对集。

在另一优选例中，所述试剂盒还包括本发明第二方面所述的探针组。

在另一优选例中，所述试剂盒包括第一容器，所述第一容器内包含引物探针混合液，所述引物探针混合液中包含SEQ ID NO.1-6所示的多核苷酸序列；优选地所述引物探针混合液由PCR缓冲液配制。

在另一优选例中，所述第一容器内还包含dNTPs。