[发明专利]小麦籽粒多酚氧化酶基因Ppo1突变体及其应用

权利要求书

1.蛋白质，为蛋白质A或/和蛋白质B；

所述蛋白质A为如下任一：

(A1)将Ppo-D1蛋白的第299位的甘氨酸替换为精氨酸后得到的SEQ ID No.1所示的蛋白质；

(A2)在(A1)所限定的蛋白质的N端和/或C端连接标签后得到的融合蛋白；

所述蛋白质B为如下任一：

(B1)将Ppo-A1蛋白的第251位的脯氨酸替换为亮氨酸后得到的SEQ ID No.2所示的蛋白质；

(B2)在(B1)所限定的蛋白质的N端和/或C端连接标签后得到的融合蛋白。

2.编码权利要求1所述蛋白质的核酸分子。

3.根据权利要求2所述的核酸分子，其特征在于：所述核酸分子为编码权利要求1所述蛋白质的基因；所述基因为基因A或/和基因B；

所述基因A为SEQ ID No.3所示的DNA分子；

所述基因B为SEQ ID No.4所示的DNA分子。

4.含有权利要求2或3所述核酸分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。

5.权利要求2或3所述的核酸分子或权利要求4所述的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌在如下任一中的应用：

(C1)下调小麦Ppo1基因总表达量；或制备用于下调小麦Ppo1基因总表达量的产品；

(C2)下调小麦Ppo-A1和/或Ppo-B1基因和/或Ppo-D1基因表达量；或制备用于下调小麦Ppo-A1和/或Ppo-B1基因和/或Ppo-D1基因表达量的产品；

(C3)降低小麦籽粒PPO活性；或制备用于降低小麦籽粒PPO活性的产品。

6.一种降低小麦籽粒PPO活性的方法，包括如下步骤(D1)或/和(D2)：

(D1)仅将受体小麦基因组中编码Ppo-D1蛋白的第299位的甘氨酸的密码子替换为编码精氨酸的密码子；

将所述受体小麦基因组中编码Ppo-D1蛋白的第299位的甘氨酸的密码子替换为编码精氨酸的密码子为将所述受体小麦基因组中编码Ppo-D1蛋白的基因替换为编码由SEQ IDNo.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质的基因；

(D2)仅将受体小麦基因组中编码Ppo-A1蛋白的第251位的脯氨酸的密码子替换为编码亮氨酸的密码子；

将所述受体小麦基因组中编码Ppo-A1蛋白的第251位的脯氨酸的密码子替换为编码亮氨酸的密码子为将所述受体小麦基因组中编码Ppo-A1蛋白的基因替换为编码由SEQ IDNo.2所示的氨基酸序列组成的蛋白质的基因。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述(D1)中，所述编码由SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质的基因为SEQ ID No.3所示DNA分子；

所述(D2)中，所述编码由SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的蛋白质的基因为SEQID No.4所示DNA分子。

8.如下任一应用：

(D1)权利要求1所述的蛋白质或权利要求2或3所述的核酸分子或权利要求4所述的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌或权利要求5所述应用或权利要求6或7所述方法在小麦面粉或面制品颜色改良中的应用；

(D2)利用权利要求6或7所述方法培育得到的籽粒PPO活性降低的小麦品种在小麦育种中的应用。