[发明专利]一种兼具脱细胞和灭菌的真皮基质的制备方法

说明书

本发明涉及一种兼具脱细胞和灭菌的真皮基质的制备方法，包括以下步骤：S1、取皮：取同种异体皮或异种皮肤组织，用刀片刮去表皮的毛发，将处理后的同种异体皮或异种皮的表皮面置于取皮机，切取含表皮的真皮基质；S2、初次清洗；S3、去除表皮层：将经过初次清洗处理后的真皮基质裁剪，将经过裁剪后的真皮基质置于高渗溶液中进行浸泡处理，浸泡处理后揭去表皮层；S4、再次清洗：将经过去除表皮层后的真皮基质用纯化水进行再次清洗处理；S5、包装：将经过再次清洗处理后的真皮基质置于包装袋中进行包装；S6、超临界CO₂处理。本发明的有益效果在于，提供一种高效、低毒、绿色环保的兼具脱细胞和灭菌的真皮基质的制备方法。

技术领域

本发明涉及一种兼具脱细胞和灭菌的真皮基质的制备方法。

背景技术

脱细胞异体/异种真皮基质是由同种异体或异种皮肤经过脱细胞处理后得到的一种细胞外基质。因其生物相容性较好，被广泛应用于烧伤、整形等领域。据现报道的脱细胞真皮基质通常会使用表面活性剂或酶进行脱细胞处理，如十二烷基磺酸钠、磷酸三丁酯、脱氧胆酸钠、Triton X-100，胰蛋白酶、胃蛋白酶或中性蛋白酶，上述化学试剂大多数具有一定毒性，如果试剂残留必然会导致机体生产不良反应，且过度化学试剂处理对真皮基质的性能也有一定程度的影响。而酶的使用和残留也会给脱细胞真皮基质带来一定安全隐患。

同时，上述常规方法处理工序复杂，时间较长，容易滋生细菌，不利于规模化生成。例如中国发明专利CN 105126170 B公开了一种脱细胞异体真皮的制备方法，其使用了如氢氧化钠、正乙烷、乙醇、胃蛋白酶、过氧乙酸、SDS等不低于8种化学试剂，共计处理时间超过50小时。中国发明专利CN 105079880 B公开了一种生物相容性良好的异种兼具脱细胞和灭菌的真皮基质的制备方法，其中也用到了新洁尔灭、胰蛋白酶、SDS、双氧水等不低于9种化学试剂，共计处理时间超过48小时。中国专利CN 105268022 B公开了一种异种无细胞真皮基质的制备方法，其中也用到了SDS、NaOH、角蛋白酶、胰蛋白酶、1398酶等7～8种化学试剂，处理时间超过24小时。

发明内容

鉴于现有技术中存在的上述问题，本发明的主要目的在于提供一种高效、低毒、绿色环保的兼具脱细胞和灭菌的真皮基质的制备方法。

本发明的技术方案是这样的：

一种兼具脱细胞和灭菌的真皮基质的制备方法，包括以下步骤：

S1、取皮：取同种异体皮或异种皮肤组织，用刀片刮去表皮的毛发，将处理后的同种异体皮或异种皮的表皮面置于取皮机，切取具有一定厚度且含表皮的真皮基质，同时去除多余的脂肪组织；

S2、初次清洗：将切取好的真皮基质置于等渗溶液中进行初次清洗处理，且初次清洗处理的时间为10min～30min；

S3、去除表皮层：将经过初次清洗处理后的真皮基质裁剪成临床所需的不同规格，然后将经过裁剪后的真皮基质置于高渗溶液中进行浸泡处理，浸泡时间为4～8h，浸泡处理后揭去表皮层；

S4、再次清洗：将经过去除表皮层后的真皮基质用纯化水进行再次清洗处理，且再次清洗处理的时间为15min～30min；

S5、包装：将经过再次清洗处理后的真皮基质置于包装袋中进行包装，同时对所述包装袋进行封口；

S6、超临界CO₂处理：将经过包装好的真皮基质置于超临界CO₂萃取设备中，通过所述超临界CO₂萃取设备对真皮基质进行超临界CO₂处理，即可得到脱细胞和灭菌的真皮基质。

步骤S1中所述真皮基质的厚度为0.1mm～3.0mm。

步骤S2中所述等渗溶液为NaCl溶液，且所述NaCl溶液浓度为0.9％。