[发明专利]一种色谱分离介质的制备方法

说明书

本发明涉及一种色谱分离介质的制备方法，其特征在于，其具体步骤为：(1)将一定量的多孔氨基硅球加入到有机溶剂中，搅拌使其润湿，均匀分散；(2)将8‑羧基黄酮加入到悬浮有多孔氨基硅球的有机溶剂中，搅拌，混合均匀；(3)再加入催化剂，加热反应一段时间，过滤；(4)用有机溶剂洗涤多次，加热烘干；得到色谱分离介质。本发明键合黄酮基团的色谱分离介质，酰胺键对酚羟基的吸附作用，黄酮基团对苯环等双重作用使本发明色谱介质的分离选择性能由于一般填料，尤其是制备负载量更大，可明显提高花青素类提纯的效率。

技术领域

本发明涉及色谱技术领域，具体的说，是一种色谱分离介质的制备方法。

背景技术

花青素是一类自然界中广泛纯在于植物中的天然色素，与水果蔬菜的颜色密切相关。花青素可以和蛋白质结合防止过氧化，有抗突变、预防心脑血管疾病、保护肝脏、增强免疫系统抵御癌症的功能，还能增进视力。其中，蔓越莓种植面积广，产量高，蔓越莓中的花青素可以有效抑制幽门螺旋杆菌，抵抗细菌性胃溃疡，减少胃癌、心血管病变的发生率，预防老年痴呆，维持肌肤年轻健康。

目前食品工业上所用的色素多为合成色素，几乎都有毒性，长期使用会危害人的健康，因此植物中天然色素的提取和纯化也就引起了科技领域的关注。花青素的分离纯化工艺一般有以下几种方法：

液-液萃取法就是采用有机溶剂通过液相萃取的方法进行纯化，溶剂用量大，分离效果较差且得到的产品质量少，还容易造成产品中有毒物质的残留。专利CN 106243075A公开了一种蓝莓花青素的分离方法，先把蓝莓果破碎，然后用酸化乙醇进行提取，再蒸发干燥，用正己烷对干燥的产物进行萃取得到蓝莓花青素。

柱层析法提取纯化花青素纯度可以达到90％以上，但是产率很低。专利CN200710037281.8公开了一种从蔓越莓提取原花青素的方法，先对原料进行处理得到提取液，再进行脱脂处理，用柱层析法进行提纯，有机溶剂易残留，溶解性选择差，具有局限性。

大孔树脂法分离工艺是把粗提的花青素通过大孔树脂色谱柱进行分离，再用有机溶剂进行洗脱，浓缩干燥即得到产品，这种方法跟大孔树脂的选择性有较高的联系，纯度不能稳定的得到控制。专利CN 102336794A公开了一种从蔓越莓中提取分离锦葵花素-3-0-葡萄糖苷的方法，通过水提取、大孔树脂吸附、乙醇解吸、聚酰胺吸附、乙醇梯度洗脱，浓缩、干燥即得产品。专利CN 105294633A公开了一种从蔓越莓中制备蔓越莓花青素的工业化的方法，该方法通过酸水溶液提取、絮凝除杂、大孔树脂吸附纯化、减压浓缩、喷雾干燥后得到产品。

微生物法是通过微生物的降解作用，分解植物的细胞壁，再用水提取，通过大孔树脂纯化，浓缩，干燥得到产品。专利CN 106632204A公开了一种从蔓越莓中提取纯化花青素的方法，该方法得到的花青素产量低，且含有一定比例的花色苷。

超临界流体萃取技术采用纯二氧化碳作为流体溶剂，安全无毒，超临界状态下二氧化碳对物料有着特殊的渗透性和溶解能力。超临界二氧化碳的密度对温度和压力变化十分敏感，通过控制二氧化碳的密度、压力、温度使超临界流体变成普通气体，与被萃取物质分开，从而达到分离提纯的目的。专利CN 109761946A公开了一种蔓越莓花青素的提取分离方法，该法使用乙醇提取结合超临界流体分离纯化二氧化碳，经过两次结晶，纯度高达99％。

常规纯化方法，过程繁琐，操作复杂，且成本高，产率低。而且提取温度高易造成花青素降解。色谱法是天然产物分离纯化过程中使用率较高的方式，但是色谱法成本高，且产物的纯度受填料的影响较大，且在制备上产量效率低。为解决以上问题，本专利提供了一种分离纯化花青素专用色谱柱填料的制备方法，把带有羧基的黄酮键合到硅球上，酰胺键和苯环分别对花青素上的酚羟基和苯环产生吸附作用，增强了花青素在色谱柱上的保留，产物纯度高，并且能够用于制备色谱，也满足了工业生产需求。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种色谱分离介质的制备方法。