[发明专利]一种微流体芯片荧光数据连续采集方法

说明书

本发明公开了一种微流体芯片荧光数据连续采集方法，所述方法包括：光路系统与微流体芯片保持垂直，并使光路系统在微流体芯片上形成的光斑中心处于所有反应池中心所在的圆周上；微流体芯片沿其圆周方向旋转，使光路系统沿微流体芯片旋转方向进行荧光数据采集；对采集的荧光数据进行处理获得所有反应池的有效荧光数据。本发明采用对微流体芯片从圆周方向进行了检测并进行了连续采集，避免了单点采集时机械位置误差导致测量结果不准确的问题。

技术领域

本发明涉及微流体芯片数据采集技术领域，尤其是一种微流体芯片荧光数据连续采集方法。

背景技术

核酸分析在生命科学、医学、食品安全、环境监测等领域广泛使用。本方法使用的是一种微流体芯片检测技术，将样品制备、生化反应和分析检测等不连续过程集成在一张微流体芯片中，实现从样品反应到结果检测的整体微型化、自动化、集成化与便携化。如何正确、有效的采集到核酸扩增过程中荧光信号数据，成为核酸分析的关键因素。

现有的微流体芯片核酸扩增检测方法，是一种单点式采集模式；是通过电机带动微流体芯片旋转，在微流体芯片反应池到达指定位置后停止旋转，此时光路系统读取反应池荧光信号值，MCU在对读取出的几百个荧光信号值进行平均算法处理，得到该反应池的最终荧光信号值。此方法对电机旋转角度精度要求较高，可靠性低，实用性差；实际使用过程中由于电机的误差导致检测位置与反应池出现偏移(见图1)，荧光信号值采集不准确；且不能兼顾电机高速离心，低速检测的模式；每次都在指定位置读取反应池荧光信号值，不能真实反映出该反应池的真实荧光信号值及变化。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：针对上述存在的问题，提供一种微流体芯片荧光数据连续采集方法。

本发明采用的技术方案如下：

一种微流体芯片荧光数据连续采集方法，所述方法包括：

光路系统与微流体芯片保持垂直，并使光路系统在微流体芯片上形成的光斑中心处于所有反应池中心所在的圆周上；

微流体芯片沿其圆周方向旋转，使光路系统沿微流体芯片旋转方向对反应池内检测区域采集荧光数据；

对采集的荧光数据进行处理获得所有反应池的有效荧光数据。

作为优选，微流体芯片沿其圆周方向顺时针或逆时针旋转。

进一步，每次采集荧光数据时，所述微流体芯片沿其圆周方向旋转一圈。

进一步，对采集的荧光数据进行处理获得所有反应池的有效荧光数据的方法为：

(1)计算覆盖每个反应池的检测区域的荧光数据个数其中，m为所述微流体芯片沿其圆周方向旋转一圈采集的所有荧光数据个数，n为所述微流体芯片上的反应池个数；

(2)从一个反应池的荧光数据中取出最大值A；

(3)令B＝A*S，其中，S为设定系数，0S1；

(4)计算出覆盖该反应池的l个荧光数据中大于B的荧光数据个数N；

(5)如果N≥P，P为预设阈值，则将A作为此刻该反应池的有效荧光数据；

(6)对每个反应池按照(2)～(5)的步骤获得有效荧光数据。

进一步，如果N＜P，则从一个反应池的荧光数据中取出次最大值An，然后再执行(2)～(5)的步骤，直至N≥P时将当前选取的此最大值An作为有效荧光数据。