[发明专利]一种酶-高分子阵列涂层微芯片快速检测葡萄糖的方法及其应用

权利要求书

1.一种用于快速检测葡萄糖的阵列涂层微芯片，其特征在于，包括配有至少10个以上反应池的微芯片中沉积有酶-高分子阵列涂层，该阵列涂层由直径400~600nm的酶-高分子共聚物组成；所述酶-高分子阵列涂层的制备如下：取甲氧基聚乙二醇醛mPEG-ALD、葡萄糖氧化酶GOx冻干粉和辣根过氧化物酶HRP冻干粉，以质量比=10:10:1混合后，溶于pH=5~6的盐酸水溶液中，其中mPEG-ALD盐酸水溶液的质量比=5:1，充分搅拌直至完全溶解后备用；微芯片中每个反应池滴加10μL上述共聚物溶液，密闭静置于37下充分反应24h后，经37鼓风干燥3~5h，风速保持0.5~1 后制得阵列涂层微芯片。

2.根据权利要求1所述的用于快速检测葡萄糖的阵列涂层微芯片，其特征在于，所述微芯片中反应池为空芯锥台柱状体，固定在25mm×76mm×1mm玻璃片上，成5×2的排列形式。

3.一种酶-高分子阵列涂层微芯片快速检测葡萄糖的方法，其步骤是，将待测样品溶液与2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐即ABTS互溶后，滴在权利要求1所述的微芯片反应池里，涂层中GOx与葡萄糖产生过氧化氢，过氧化氢与ABTS在HRP的催化下产生绿色物质ABTS+，根据溶液颜色变化可定性判断是否含有葡萄糖，再根据410nm波长下的吸光度值可定量判断葡萄糖的浓度。

4.根据权利要求3所述的酶-高分子阵列涂层快速检测葡萄糖的方法的应用，其特征在于，应用混合时待测溶液仅取5~10μL；ABTS溶液取5~10μL，ABTS的浓度为10 。

5.根据权利要求1所的一种用于快速检测葡萄糖的阵列涂层微芯片的应用，其特征在于，所述阵列涂层微芯片检测葡萄糖具有专一性，检测葡萄糖浓度≥0.05的样品，完成一个样品检测耗时30秒，单个待测样品的进样量仅需5~10μL。

6.根据权利要求1所的一种用于快速检测葡萄糖的阵列涂层微芯片的应用，其特征在于，用移液枪吸取10μL待测样品溶液滴加到微芯片每个反应池中，秒表计时30s，观察显色现象；将反应完成后的溶液吸出放入酶标仪中，用λ=410nm条件下测吸光度值并根据标准曲线计算出葡萄糖浓度。