[发明专利]一种白色牛樟芝人工培育方法

说明书

本发明具体涉及一种白色牛樟芝人工培育方法，包括无菌采样、菇体切片、复壮纯化、培养基制备、接菌培养、采集封装等步骤，本发明通过上述技术方案，解决了目前人工培育技术无法培育出白色牛樟菇的问题，并且提高牛樟菇中总三萜和多糖的含量，通过转换苦荞麦培养基培植出来的白色牛樟菇成功去除了原来含有的毒素，并且该技术可量化生产白色牛樟菇，通过多次提纯—复壮过程，培植出纯白色牛樟菇；通过时间控制和温湿度控制，使牛樟菇的菌丝体集结成块，大大提高了牛樟菇总三萜的含量，多糖含量也提高到14.8％的高度。

技术领域

本发明属于生物培养技术领域，具体涉及一种白色牛樟芝人工培育方法。

背景技术

牛樟芝又名牛樟菇，属于非褶菌目、多孔菌科、薄孔菌属、多年生蕈菌类，是1990年才发现命名的新种。其生长区域为中国台湾山区海拔450-2000米山林间，只生长在中国台湾特有百年以上的牛樟树树干腐朽之心材内壁，樟树木材潮湿表面，采集不易。野生的牛樟芝长在老龄的牛樟树，子实体形态多变化，有板状、锺状、马蹄状或塔状；初生时鲜红色，渐长变为白色、淡红褐色、淡褐色或淡黄褐色。其气芳香、味辛苦、平，有祛风行气、化淤活血、温中消结、解毒消肿、镇静止痛、抗菌、抗病毒、抗肿瘤之功效；对于治疗胃肠疼痛、腹泻呕吐、食物中毒、毒蕈中毒、糖尿病、酒精肝、脂肪肝、肝硬化、肝癌等更是有独特功能。牛樟芝具有许多的生理活性成分，如多糖体、三萜类化合物、超氧歧化酶、腺苷、维生素、微量元素、核酸、凝集素、氨基酸、固醉累、纤维素、血压稳定物质等。牛樟芝在中国台湾亦被称为森林中的红宝石，一直盛有”灵芝之王”的美誉。由于野生牛樟芝在民间应用时所产生的惊人疗效以及野生原料资源枯竭，不但使得其价格高涨，也催生了牛樟芝的人工培育。

目前，对于牛樟芝人工培育大致可以分为椴木栽培法、固体培养法、液体发酵法三种，同时不同的培育方法培育的牛樟芝活性成分会存在着一定的差异，应用领域也存在着区别。目前白色牛樟芝的培育极为少见，并且人工培育出来的红色牛樟芝中“总三萜”只存在于子实体中，菌丝体中“总三萜”的含量几乎为零，现有的技术培育的牛樟芝多糖含量有限，因此，本领域的技术人员亟待寻求一种能够解决上述技术问题的培育方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种白色牛樟芝人工培育方法，以解决上述技术问题。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种白色牛樟芝人工培育方法，包括如下步骤：

(1)无菌采样：对白色牛樟芝子实体进行无菌处理；

(2)菇体切片：将白色牛樟芝子实体进行切片获得子实体切片；

(3)复壮纯化：将得到的子实体切片采用菌种培养基进行菌种纯化得到白色牛樟芝菌种；

(4)培养基制备：制备苦荞麦基培养基；

(5)接菌培养：将步骤(3)得到的菌种移植到步骤(4)制备的培养基上进行培养；

(6)采集封装：采集后依次经过烘干、灭菌、粉碎处理，检验合格后封装。

所述无菌采样步骤具体为将刀片先75％酒精消毒后，将木头上的白色牛樟芝菇体切下，采用干净的纱布或塑料袋将菇体包好。

所述无菌处理步骤是在菌株分离前，采用75％酒精擦拭并照射UV光20分钟后，即可将白色牛樟芝菇体放入无菌操坐台。

所述菇体切片步骤具体为采用沾有75％酒精的棉花或纱布将菇体表面擦拭一遍，用解剖刀除去菇体表皮，并将里面肉质部分分割成0.5cm大小的子实层切片。

所述复壮纯化步骤具体为将得到的子实体切片接种菌种培养基上培养，经过4-6次的移植后确认无杂菌出现即可获得白色牛樟芝菌种。

所述菌种培养基为含有质量浓度为1-3％w/w的马铃薯葡萄糖提取物和质量浓度为0.5-1.5％w/w的琼脂的培养皿。