[发明专利]用于检测马流产沙门氏菌抗体的间接ELISA试剂盒及其制备方法和应用在审
| 申请号: | 202010148906.3 | 申请日: | 2020-03-05 |
| 公开(公告)号: | CN111458501A | 公开(公告)日: | 2020-07-28 |
| 发明(设计)人: | 王晓钧;胡哲 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) |
| 主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/543;G01N33/535 |
| 代理公司: | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人: | 马鑫 |
| 地址: | 150009 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 检测 流产 沙门氏菌 抗体 间接 elisa 试剂盒 及其 制备 方法 应用 | ||
1.用于检测马流产沙门氏菌抗体的间接ELISA试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒中包含马流产沙门氏菌FljB蛋白包被的酶标板,其中,所述的马流产沙门氏菌FljB蛋白由SEQID NO.2所示的序列编码。
2.如权利要求1所述的间接ELISA试剂盒,其特征在于,马流产沙门氏菌FljB蛋白的包被抗原浓度为1μg/ml。
3.如权利要求1所述的间接ELISA试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒中还包含酶标二抗、包被液、封闭液、血清稀释液、显色液、洗涤液和终止液。
4.如权利要求1所述的间接ELISA试剂盒,其特征在于,所述酶标二抗为HRP标记山羊抗马IgG二抗,所述包被液为磷酸盐缓冲液,所述封闭液为5%w/v的脱脂乳;所述血清稀释液为5%w/v BSA溶液;所述显色液为显色液TMB;所述洗涤液为PBST缓冲液;所述终止液为2MH2SO4。
5.如权利要求1-4任一项所述的间接ELISA试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒用于检测马流产沙门氏菌抗体时,具体的包括以下步骤:
(1)包被马流产沙门氏菌FljB蛋白的酶标板4℃过夜后用洗涤液洗涤,37℃下用封闭液封闭1.5h,洗板;
(2)分别加入对照和待测血清样品,37℃孵育1h,洗板;
(3)加入HRP标记山羊抗马IgG二抗,37℃孵育30min,洗板;
(4)加入TMB显色液,37℃显色5min,最后加终止液终止反应,测定OD450nm值,当OD450nm值0.141时,判定为阳性。
6.权利要求1-5任一项所述的间接ELISA试剂盒在制备检测马流产沙门氏菌抗体试剂中的应用。
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