[发明专利]编码鸡血藤查尔酮合成酶的基因及其应用

说明书

本发明公开了一种编码鸡血藤查尔酮合成酶的基因及其应用，该基因为首次从鸡血藤中获得，填补了我国传统中药材鸡血藤中分离克隆查尔酮合成酶基因的空白。本发明所提供的查尔酮合成酶基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或者添加、取代、插入或缺失一个或多个核苷酸的同源序列或其等位基因及其衍生的核苷酸序列。所述基因编码的蛋白质具有SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列或者添加、取代、插入或缺失一个或多个氨基酸的同源序列。该基因在鸡血藤根、茎、叶、花以及果实中均有表达，其中在叶和花中表达量较高。本发明提供的查尔酮合成酶基因应用与提高鸡血藤中黄酮类化合物活性成分的含量，对今后鸡血藤种质资源改良具有很好的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，涉及鸡血藤黄酮类化合物合成途径中的关键酶及其编码基因，更具体地说，本发明涉及编码鸡血藤查尔酮合成酶的基因及其应用。

背景技术

鸡血藤来源于豆科(Leguminosae)植物密花豆(Spatholobus suberectus Dunn)的干燥藤茎，为常用中药，味苦、甘，性温，归肝、肾经。具有补血活血，调经止痛，舒筋活络的功效。用于治疗月经不调，痛经，经闭，风湿痹痛，麻木瘫痪，血虚萎黄等病症，广泛用于妇科、风湿痹痛等中成药中。目前市场上商品鸡血藤药材主要来源于野生资源，由于多年的采收导致中国的野生资源已濒临枯竭。

药用植物的次生代谢产物是中药材药效成分的主要来源，药效成分形成受其代谢途径中功能基因的调控。黄酮类化合物是植物次生代谢产物，常以游离态或与糖结合为苷的形式存在，数量种类繁多，结构类型复杂多样，在疾病的治疗过程中发挥重要的作用。黄酮类化合物是最早从鸡血藤药材中分离得到的化合物，且是鸡血藤发挥药效的主要成分，目前共分离鉴定了60个黄酮类化合物。

查尔酮合成酶是植物类黄酮物质生物合成途径中的第一个酶，也是黄酮类化合物合成的限速酶，对植物具有非常重要的生理意义。然而，目前尚未发现鸡血藤查尔酮合成酶(SsCHS)基因的克隆和作为提高植物中黄酮类化合物含量的应用研究。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述缺陷，并提供至少后面将说明的优点。

本发明的另一个目的是通过基因克隆，获得鸡血藤查尔酮合成酶(简称SsCHS)基因的gDNA序列、cDNA序列及氨基酸序列，为后续利用生物技术手段提高鸡血藤有效部位黄酮类化合物的含量提供重要基础。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，本发明提供编码鸡血藤查尔酮合成酶的gDNA，其中，为下列核苷酸序列之一：

1)具有SEQ ID No.1所示的序列；

2)能编码SEQ ID No.1经添加、取代、插入或缺失一个或多个氨基酸且具有鸡血藤查尔酮合成酶活性蛋白质的核苷酸序列。

编码鸡血藤查尔酮合成酶的cDNA，其中，为下列核苷酸序列之一：

1)具有SEQ ID No.2所示的序列；

2)在严格条件下与SEQ ID No.2的cDNA序列杂交且编码具有鸡血藤查尔酮合成酶活性蛋白质的DNA分子；

3)编码SEQ ID No.3所示氨基酸序列的核苷酸序列；

4)编码SEQ ID No.3经添加、取代、插入或缺失一个或多个氨基酸且具有鸡血藤查尔酮合成酶活性蛋白质的核苷酸序列。

具有鸡血藤查尔酮合成酶活性的蛋白质，其中，为下列氨基酸序列之一：

1)具有SEQ ID No.3所示的氨基酸序列；

2)SEQ ID No.3经添加、取代、插入或缺失一个或多个氨基酸且具有鸡血藤查尔酮合成酶活性的氨基酸序列。