[发明专利]SARS-CoV-2抑制剂及其应用

说明书

本发明涉及SARS‑CoV‑2抑制剂及其应用，具体涉及一种针对SARS‑CoV‑2的中和抗体及其应用。本发明采用噬菌体展示技术，构建了一个高容量的人源免疫性噬菌体抗体文库，并以SARS‑CoV‑2‑S蛋白为靶标，筛选人源抗体单链抗体片段并获得了对SARS‑CoV‑2病毒有较强的中和作用的抗体。本发明的抗体可以用于治疗新型冠状病毒感染引起的疾病，具有重要的临床应用价值。

技术领域

本发明属于细胞免疫学领域，具体涉及一种针对SARS-CoV-2的中和抗体及其应用。

背景技术

新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019，COVID-19)，简称“新冠肺炎”，是由SARS-CoV-2病毒感染导致的肺炎，呼吸道飞沫传播是主要传播途径，在相对封闭的环境中长时间暴露于高浓度气溶胶情况下存在经气溶胶传播的可能，其他传播途径尚待明确；人群普遍易感，潜伏期1～14d，一般为3～7d。临床类型包括无症状感染者、轻型、普通型、重型和危重型，老年及有基础疾病病例预后较差，儿童病例症状相对较轻。截至2020年2月27日11时，全国累计报告确诊病例78630例，累计死亡病例2747例；目前，日本、韩国、伊朗、意大利、美国等也有病案报道，COVID-19已对全球人类健康构成了严重威胁。

新型冠状病毒肺炎的病原SARS-CoV-2为冠状病毒科β病毒属，是线性正链RNA病毒，研究发现，SARS-CoV-2在进化树的位置上，与SARS-CoV、类SARS-CoV的类群相邻，新型冠状病毒有4种主要的结构蛋白：刺突蛋白(spike protein，S蛋白)，核衣壳蛋白(nucleocapsid，N蛋白)，膜蛋白(membrane protein，M蛋白)，包膜蛋白(envelopeprotein，E蛋白)。S蛋白含有两个亚基，S1和S2，S1包括N-末端域和C-末端RBD域。S-RBD与人ACE2互作进而感染人的呼吸道上皮细胞，对于病毒感染起到重要作用，是宿主中和抗体的重要作用位点以及疫苗设计的关键靶点。COVID-19传播迅速、疫情紧急，目前尚无有效的疫苗用于预防，人感染了SARS-CoV-2，亦无特效药用于临床，主要以对症治疗为主。而作为疫苗和化学治疗的补充，由抗体介导的预防和治疗病毒感染的措施已显现良好的效果，其应用前景得到专家的认同。目前已经有将COVID-19患者康复后的血浆，输注给重症病人实现治愈的成功案例。但多抗血浆不仅来源有限，同时其临床应用也受到诸如难以质控、供受体血型不匹配、潜在的传染性因子等条件的限制，而人源单克隆抗体可有效克服上述问题。

本专利采用噬菌体展示技术，构建了一个高容量的人源免疫性噬菌体抗体文库，并以SARS-CoV-2-S蛋白为靶标，筛选人源抗体单链抗体片段(single chain variablefragment,ScFv)，获得几种人源ScFv抗体分子。进一步的实验研究表明，该单抗对SARS-CoV-2病毒有较强的中和作用，本申请为新冠肺炎的免疫治疗提供候选抗体，具有重要的临床应用价值。

发明内容

本发明的目的在于提供SARS-CoV-2病毒的中和抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段以病毒的SARS-CoV-2-S蛋白为靶标，SARS-CoV-2-S蛋白的序列为SEQ IDNO.1。

进一步，所述中和抗体或其抗原结合片段包括轻链CDR1、轻链CDR2、轻链CDR3、重链CDR1、重链CDR2和重链CDR3；

重链CDR1的氨基酸序列选自下列序列中的一种：SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQID NO.4或SEQ ID NO.5；

重链CDR2的氨基酸序列选自下列序列中的一种：SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7、SEQID NO.8或SEQ ID NO.9；

重链CDR3的氨基酸序列选自下列序列中的一种：SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.12或SEQ ID NO.13；