[发明专利]和厚朴酚在抑制猪链球菌或其生物被膜中的用途

说明书

本发明公开了和厚朴酚在抑制猪链球菌或其生物被膜中的用途。本发明发现和厚朴酚或其药学上可接受盐具有抑制猪链球菌及其生物被膜的形成或杀灭成熟的生物被膜内的猪链球菌的作用。本发明利用标准微量稀释法测定了和厚朴酚对猪链球菌MIC值，结果发现，和厚朴酚对猪链球菌的抑制MIC值接近抗生素MIC值。本发明利用高通量静态生物被膜系统法构建的体外生物被膜模型通过结晶紫法和扫描电镜研究发现亚抑菌浓度和厚朴酚能减少猪链球菌生物被膜形成并破坏猪链球菌生物被膜立体结构。本发明公开了由和厚朴酚为主要活性成分的抑制猪链球菌或其生物被膜的药物组合物，其安全性好，不存在药物残留、细菌耐药性、变态反应及消化道出血等问题。

技术领域

本发明涉及和厚朴酚的新药理用途，尤其涉及和厚朴酚或其药学上可接受盐在抑制猪链球菌或猪链球菌生物被膜中的新用途，属于和厚朴酚的新药理用途领域。

背景技术

猪链球菌病是一种全球范围内影响严重的人畜共患传染病。其中尤以荚膜血清2型猪链球菌(Streptococcus suis serotype 2SS2)病原菌传染性和致病性最强，被世界动物卫生组织列为B群动物疫病，中国将其列为2类动物疫病，给养猪业和公共卫生安全带来巨大的危害。猪链球菌感染不但可致猪急性败血症、脑膜炎、心内膜炎、关节炎和急性死亡，尤为严重的是还可以感染人，引起人的关节炎和中毒性休克综合征甚至危及生命。临床上分离的毒性SS2菌株可以形成生物被膜(Biofilm,BF)，生物被膜可通过形成致密的三维群落结构保护菌体对抗宿主的吞噬清除作用和抗生素杀菌作用，以实现猪链球菌对宿主的持续感染，这也是猪链球菌难治愈和反复发作的主要原因。BF是指细菌为了适应外部环境的变化而被自身分泌的胞外基质包裹形成的一种有别于浮游菌的特殊结构。形成BF后相比浮游菌相同条件下治疗会更困难10-1000倍。

目前，临床分离的猪链球菌在自然界中主要以群体的方式-即BF形式存在，BF是由胞外多聚物(extracellular polymeric substance,EPS)和基质网(matrix)包被的高度组织化、系统化的微生物膜性聚合物。与单细胞浮游细菌不同，形成群体生物菌落表现出一系列新的生物学特征并具有更强的适应外界环境的能力。猪链球菌BF的形成是一个动态过程，细菌首先完成定植和粘附，经历生长期后达到成熟，成熟的生物被膜内部结构近似原始的循环系统，在微菌落间存在输水通道，运输新陈代谢所必须的酶与养料并把代谢产物和废物排出体外。成熟后的生物被膜由于营养物质等原因会从定植表面脱落并破裂，使细菌恢复到浮游菌状态，到达BF的播散期。浮游菌继续完成黏附、生长、分裂、分化这一过程，开始进入下个生物被膜形成周期。具有三维结构的菌落系统类似高等生物的发育周期也是导致细菌产生抗药性和感染性疾病难以治愈的重要原因。

被生物被膜包围的细菌称为被膜菌(biofilm bacteria)，游离与生物被膜之外独立生长的细菌称为浮游菌(planktonic bacteria)，被膜菌与浮游菌在形态学上存在着显著差异。普通抗生素可以直接杀灭生物被膜表面的浮游菌，但由于生物被膜的屏障保护作用，使得抗生素难以到达被膜内部起到效果。此外，被膜内细菌氧气供应不足和代谢产物累积，从而使细菌生长缓慢，对抗菌药物不敏感，是细菌产生耐药性的主要原因。同时，细菌生物被膜侵袭机体之后，不断释放抗原诱导机体产生特异性抗体，胞外基质(EPS)起着物理屏障和将细菌与机体免疫系统隔离的作用，从而使自然杀伤细胞、吞噬细胞、特异性抗体、溶菌酶、致敏性T细胞等对细菌的免疫作用丧失。

综上所述，猪链球菌形成生物被膜后导致细菌产生抗药性和感染性疾病难以治愈。目前，干预猪链球菌生物被膜形成的常用药物有红霉素、阿奇霉素、泰乐菌素和阿司匹林。但是抗生素及非甾体类抗菌药物只能杀灭浮游菌，并不能真正杀灭被膜菌，长期应用后，还会出现药物残留、细菌耐药性、变态反应及消化道出血等问题，亟待需要研制能够有效干预猪链球菌生物被膜且不存在这些副作用的药物。

发明内容

本发明的主要目的是提供一种能够有效抑制猪链球菌或干预猪链球菌生物被膜的药物。

本发明的上述目的是通过以下技术方案来实现的：