[发明专利]C-P串联表达重组蛋白及其基因、制备方法、应用、C肽检测试剂盒有效

专利信息
申请号: 202010135197.5 申请日: 2020-03-02
公开(公告)号: CN111269310B 公开(公告)日: 2023-03-31
发明(设计)人: 赵巧辉;李桂林;徐延伟;付光宇 申请(专利权)人: 郑州伊美诺生物技术有限公司
主分类号: C07K14/62 分类号: C07K14/62;C12N15/17;C12N15/70;G01N33/74
代理公司: 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 代理人: 潘颖
地址: 450000 河南省郑州市*** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: 串联 表达 重组 蛋白 及其 基因 制备 方法 应用 检测 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种C-P串联表达重组蛋白,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示。

2.编码权利要求1所述C-P串联表达重组蛋白的基因,其特征在于,其核苷酸序列如SEQID NO:6所示。

3.权利要求1所述C-P串联表达重组蛋白的制备方法,其特征在于,包括:以SEQ ID NO:6所示基因为模板,使用SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:9所示的引物组进行PCR扩增,扩增产物经过BamHI和NotI双酶切后,构建到C-P-F1/R2-pet32a中,筛选阳性克隆菌,提取质粒后导入表达宿主细胞,经IPTG诱导表达出目的蛋白,经纯化后获得C-P串联表达重组蛋白。

4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述宿主细胞为BL21DE3。

5.根据权利要求3或4所述的制备方法,其特征在于,所述纯化为采用Hitrap进行纯化。

6.权利要求1所述C-P串联表达重组蛋白在制备C肽标准品或质控品中的应用。

7.一种C肽检测试剂盒,其特征在于,包括用于制备C肽标准品或质控品的C-P串联表达重组蛋白;

所述C-P串联表达重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示。

8.根据权利要求7所述的C肽检测试剂盒,其特征在于,还包括包被C-P抗体的酶免板/发光板/磁性微球、C-P抗体标记有辣根过氧化物酶/碱性磷酸酶、酶免显色剂/化学发光底物中的一种或几种。

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