[发明专利]新型冠状病毒抗原及其检测用途

说明书

本发明涉及病毒学检测领域。具体而言，本发明涉及新型冠状病毒抗原及其检测用途，本发明提供了对2019‑nCoV特异性的IgM抗体和总抗体的方法以及确定受试者是否患有2019‑nCoV感染的方法，以及用于上述检测的病毒抗原及试剂盒，所述病毒抗原是一种分离的多肽，其包含选自下列的氨基酸序列或由其组成：SEQ ID NO：1所示的序列，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加的序列，或与其具有至少80％的序列同一性的序列。

技术领域

本发明涉及病毒学检测领域。具体而言，本发明提供了对2019-nCoV特异性的IgM抗体及总抗体进行测定的方法、以及确定受试者是否患有2019-nCoV感染的方法，以及用于上述检测的病毒抗原及试剂盒。

背景技术

2019新型冠状病毒，即“2019-nCoV”，属于冠状病毒属，冠状病毒是一种包膜的单链RNA病毒，可感染野生动物、宠物，畜群和人类。

冠状病毒属于尼多病毒目冠状病毒科，病毒粒子呈球形或不规则形，有囊膜，大小为80-120nm。该病毒一般包括纤突蛋白(Spike，S)、小包膜蛋白(Envelope，E)、囊膜蛋白(Membrance，M)、核蛋白(Nucleocapsid，N)。根据基因组的结构特点，目前将冠状病毒分为4个属，即α、β、γ和δ。2019-nCoV病毒属于β属的新型冠状病毒，有包膜，颗粒呈圆形或椭圆形，常为多形性，直径60-140nm。S蛋白是冠状病毒感染细胞的关键蛋白，携带主要的B淋巴细胞抗原决定簇，是惟一能诱导产生中和抗体和提供免疫保护作用的结构蛋白；含有宿主细胞受体识别位点，在决定宿主细胞亲嗜性方面起关键作用。决定病毒的致病性，是病毒毒力的主要决定部分。

现阶段的研究表明，2019-nCoV病毒可通过飞沫、接触和粪口传播，潜伏期一般为3-7天，最长可达21天。其临床表现以发热、乏力、干咳为主要表现。少数患者伴有鼻塞、流涕、腹泻等症状。重型病例多在一周后出现呼吸困难、严重者快速进展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和出凝血功能障碍。值得注意的是重型、危重型患者病程中可为中低热，甚至无明显发热。部分患者仅表现为低热、轻微乏力等，无肺炎表现，多数在1周后恢复。

目前，对2019-nCoV病毒的检测手段主要是荧光PCR法等核酸检测手段，但核酸检测成本较高、操作复杂，整个检测流程耗时2小时以上，而且存在感染人和容易扩散的风险，需要在生物安全二级以上实验室进行检测，难以满足大规模筛查的需求。因此急需研制安全、高效、便捷的2019-nCoV抗体检测方法。免疫学检测具有较高的敏感性和特异性，且结果易于分析，在流感的控制、扑灭和检疫中用途很大。同时，有报道指出，在SARS病毒感染后出现发烧症状的前10天内使用RT-PCR技术便可检测病人是否感染病毒，但在发病后期使用RT-PCR技术往往会出现假阴性结果，此时血清学检测技术结果更准确。因此，开发能够用于2019-nCoV病毒抗体检测的试剂盒更能便捷有效地对大量血清抗体进行检测。

发明内容

本申请的发明人经过大量的研究后出人意料地发现了特别适用于检测2019-nCoV的病毒抗原。基于此，本发明成功地建立了用于测定针对2019-nCoV特异性的IgM抗体和总抗体、以及用于确定受试者是否患有2019-nCoV感染的方法，该方法重复性好，特异性强，灵敏度高。

病毒抗原多肽

在第一方面，本发明提供了一种分离的多肽，其包含选自下列的氨基酸序列或由其组成：

(i)SEQ ID NO：1所示的序列；

(ii)与SEQ ID NO：1所示的序列相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个，3个，4个或5个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列；或

(iii)与SEQ ID NO：1所示的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性的序列。