[发明专利]一种识别HPV的T细胞受体

说明书

本发明提供了一种能够特异性结合衍生自HPV16 E7抗原的短肽YMLDLQPET的T细胞受体(TCR)，所述抗原短肽YMLDLQPET可与HLA A0201形成复合物并一起被呈递到细胞表面。本发明还提供了编码所述TCR的核酸分子以及包含所述核酸分子的载体。另外，本发明还提供了转导本发明TCR的细胞。

技术领域

本发明涉及能够识别源自HPV16 E7抗原短肽的TCR及其编码序列，本发明还涉及转导上述TCR来获得的HPV16 E7特异性的T细胞，及他们在预防和治疗HPV16 E7相关疾病中的用途。

背景技术

HPV16 E7基因为人乳头状瘤病毒(HPV)基因组的早期区基因之一，其编码的E7蛋白是约含100个氨基酸的小酸性蛋白。在世界范围内子宫颈癌中最流行的类型为HPV16,占检测病例的50％～60％(Acta Acad Med Sin,2007,29(5):678-684)，其中高危型HPV16 E7蛋白是HPV诱发宫颈癌的一个重要原因。在HPV感染的头颈部肿瘤中，E7癌蛋白起免疫抑制的作用，主要通过阻碍正常P16蛋白表达引起细胞周期异常导致癌变(中国耳鼻咽喉颅底外科杂志，2017，23(6):594－598)。有研究表明HPV16 E7还是引起的肛门癌中较强的致癌基因(Virology.2011Dec 20；421(2):114–118.)。除此之外，HPV16 E7还会引起结膜上皮内瘤变(CIN)以及角结膜侵袭性鳞状细胞癌(SCC)(国际眼科杂志2018；18(6):1047-1050)等疾病。YMLDLQPET(SEQ ID NO:9)是衍生自HPV16 E7抗原的短肽，是HPV16 E7相关疾病治疗的一种靶标。

T细胞过继免疫治疗是将对靶细胞抗原具有特异性的反应性T细胞转入病人体内，使其针对靶细胞发挥作用。T细胞受体(TCR)是T细胞表面的一种膜蛋白，其能够识别相应的靶细胞表面的抗原短肽。在免疫系统中，通过抗原短肽特异性的TCR与短肽-主组织相容性复合体(pMHC复合物)的结合引发T细胞与抗原呈递细胞(APC)直接的物理接触，然后T细胞及APC两者的其他细胞膜表面分子就发生相互作用，引起一系列后续的细胞信号传递和其他生理反应，从而使得不同抗原特异性的T细胞对其靶细胞发挥免疫效应。因此，本领域技术人员致力于分离出对HPV16E7抗原短肽具有特异性的TCR，以及将该TCR转导T细胞来获得对HPV16 E7抗原短肽具有特异性的T细胞，从而使他们在细胞免疫治疗中发挥作用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种识别HPV16 E7抗原短肽的T细胞受体。

本发明的第一方面，提供了一种T细胞受体(TCR)，所述TCR能够与YMLDLQPET-HLAA0201复合物结合。

在另一优选例中，所述TCR包含TCRα链可变域和TCRβ链可变域，所述TCRα链可变域的CDR3的氨基酸序列为AVNPRYGNKLV(SEQ ID NO:12)；和/或所述TCRβ链可变域的CDR3的氨基酸序列为ATSDRGQGAFGEQY(SEQ ID NO:15)。

在另一优选例中，所述TCRα链可变域的3个互补决定区(CDR)为：

αCDR1-DRVSQS (SEQ ID NO:10)

αCDR2-IYSNGD (SEQ ID NO:11)

αCDR3-AVNPRYGNKLV (SEQ ID NO:12)；和/或

所述TCRβ链可变域的3个互补决定区为：

βCDR1-KGHDR (SEQ ID NO:13)

βCDR2-SFDVKD (SEQ ID NO:14)

βCDR3-ATSDRGQGAFGEQY (SEQ ID NO:15)。