[发明专利]一种新冠病毒抗体检测卡和制作方法

权利要求书

1.一种新冠病毒抗体检测卡，其特征在于，包括封装在壳体内的试纸条，所述壳体包括观察孔和加样孔；所述试纸条包括底板、样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水膜和滤血膜；所述金标垫上喷涂有胶体金-SPA溶液和胶体金-鼠抗人IgG溶液；所述硝酸纤维素膜上平行间隔设置有检测线和质控线，所述检测线上包被有新型冠状病毒S蛋白和N蛋白，所述质控线上包被有兔抗羊二抗。

2.一种新冠病毒抗体检测卡的制作方法，其特征在于，包括：

胶体金溶液的制备；

胶体金-SPA溶液的制备；

胶体金-鼠抗人IgG溶液的制备；

胶体金-鼠抗人IgM溶液的制备；

检测线和质控线的制备；

金标垫的制备；

样品垫的制备；

组装检测卡。

3.根据权利要求2所述的新冠病毒抗体检测卡的制作方法，其特征在于，所述胶体金溶液的制备，包括：

在300ml三角瓶中加入100ml超纯水，并放置于恒温加热磁力搅拌器上加热；

超纯水沸腾后，加入1ml 2％的氯金酸溶液；

超纯水加热重新沸腾后，再快速的加入1.5ml2％的二水柠檬酸三钠溶液；

超纯水继续加热至沸腾，15min后停止加热；

恢复至室温后加入超纯水恢复至原体积，在4℃温度下保存备用。

4.根据权利要求3所述的新冠病毒抗体检测卡的制作方法，其特征在于，所述胶体金-SPA溶液的制备，包括：

所述胶体金溶液在磁力搅拌器的搅拌下，用0.2mol/L的碳酸钾把胶体金溶液的pH调至6.0；

按每毫升胶体金溶液中加入16微克的量加入SPA，室温搅拌60min后加入10％的BSA溶液至终浓度为1％；

室温下继续搅拌60min，搅拌停止后，在4℃环境下以5000r/min的转速离心10min，收集离心管底部沉淀；

上层胶体金溶液在4℃环境下以8500r/min的转速离心20min，收集离心管底部沉淀，弃上清；

两次收集的胶体金沉淀，用复溶液按照标记时，胶体金溶液体积的1/25复溶，在4℃环境下保存备用。

5.根据权利要求4所述的新冠病毒抗体检测卡的制作方法，其特征在于，所述复溶液为20mM pH为7.4的PB缓冲液，其中BSA含量为1％，吐温-20为0.5％，PVP-40为1.5％，海藻糖为2％，蔗糖为5％。

6.根据权利要求2所述的新冠病毒抗体检测卡的制作方法，其特征在于，所述胶体金-鼠抗人IgG溶液的制备，包括：

胶体金溶液在磁力搅拌器的搅拌下，用0.2mol/L的碳酸钾将胶体金溶液的pH调至8.0；

按每毫升胶体金溶液中加入16微克的量加入鼠抗人IgG单克隆抗体；

室温搅拌60min后加入10％的BSA溶液至终浓度为1％，室温下继续搅拌60min；

搅拌停止后，在4℃环境下以5000r/min的转速离心10min，收集离心管底部沉淀，上层胶体金溶液在4℃环境以8500r/min的转速离心20min，收集离心管底部沉淀，弃上清；

两次收集的胶体金沉淀用复溶液按照标记时胶体金溶液体积的1/25复溶，在4℃环境下保存备用。

7.根据权利要求2所述的新冠病毒抗体检测卡的制作方法，其特征在于，所述胶体金-鼠抗人IgM溶液的制备，包括：

胶体金溶液在磁力搅拌器的搅拌下，用0.2mol/L的碳酸钾把胶体金溶液的pH调至8.0；

按每毫升胶体金溶液中加入16微克的量加入鼠抗人IgM单克隆抗体；

室温搅拌60min后加入10％的BSA溶液至终浓度为1％，室温下继续搅拌60min；

搅拌停止后，在4℃环境下以5000r/min的转速离心10min,收集离心管底部沉淀，上层胶体金溶液4℃以8500r/min的转速离心20min，收集离心管底部沉淀，弃上清；

两次收集的胶体金沉淀用复溶液按照标记时胶体金溶液体积的1/25复溶，并且在4℃环境下保存备用。