[发明专利]一种从水飞蓟制药渣粕中提取水飞蓟蛋白的方法

说明书

本发明提供一种从水飞蓟制药渣粕中提取水飞蓟蛋白的方法，包括以下步骤：将水飞蓟制药渣粕真空干燥，研磨得到渣粕粉；向渣粕粉中添加NaOH、维生素C和纯净水，恒温浸提后，离心得到浸提上清液I和浸提残渣I；向浸提上清液I中，添加盐酸调节pH值，静置沉淀后，离心获得蛋白沉淀I；对浸提液残渣I二次浸提，浸提悬浊液离心获得浸提液上清II；向浸提液上清II中，添加盐酸调节pH值，沉淀、离心获得蛋白沉淀II；合并步骤蛋白沉淀I和蛋白沉淀II，得到总蛋白提取物，冷冻干燥总蛋白提取物，得到水飞蓟粗蛋白粉。本发明提高水飞蓟蛋白的产率、总蛋白回收率和蛋白纯度，从而形成优化的从水飞蓟制药渣粕中提取水飞蓟蛋白的制备工艺。

技术领域

本发明涉及蛋白提取技术，尤其涉及一种从水飞蓟制药渣粕中提取水飞蓟蛋白的方法。

背景技术

水飞蓟是菊科水飞蓟属草本植物，作为传统的要用植物，从水飞蓟籽仁中提取的水飞蓟素具有较好的保肝护肝、抗氧化、抑制癌细胞等功效，收到保健品市场的青睐。水飞蓟渣粕是水飞蓟素提取后的剩余物，传统的方法水飞蓟渣粕主要作为畜禽蛋白饲料处理，产值和利润均较低。但是，水飞蓟渣粕中含有较高的植物蛋白，约占渣粕总干重的5-10％，且水飞蓟蛋白的氨基酸种类齐全是一种较好的植物蛋白源。我国水飞蓟渣粕的年产量约为2000-50000吨，仅辽宁省地区就可达到500-1000吨，若将水飞蓟渣粕中的植物蛋白进行工业化的分离提取，不仅会为社会创造较好的植物源性蛋白保健食品，还会为企业带来可观的产品收益，一举多得。

传统的蛋白提取工艺主要以碱提酸沉工艺为主，但是针对水飞蓟渣粕的蛋白提取还存在诸多不足，主要表现在如下几方面：1)传统方法的NaOH添加剂量不足，一般以达到溶液pH11即0.001mol/L为目标，NaOH添加浓度过低导致蛋白提取率较小，一般不足2％；2)NaOH的添加方法不准确，以达到目标pH11为标准，极容易造成NaOH的添加量不稳定，导致多次提取结果不稳定，可重复性差；3)蛋白在提取过程中，受氧化作用影响，颜色不断加深，产品必须进行脱色处理；4)等电点沉淀方法，容易造成蛋白沉淀不充分，进一步降低了蛋白的沉淀比率和产率。

发明内容

本发明的目的在于，针对目前水飞蓟制药渣粕的利用率低，以及蛋白提取困难的问题，提出一种从水飞蓟制药渣粕中提取水飞蓟蛋白的方法，该方法能有效提取蛋白，同时稳定蛋白的纯度、提取率和实际产率。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种从水飞蓟制药渣粕中提取水飞蓟蛋白的方法，包括以下步骤：

步骤(1)水飞蓟制药渣粕经回收集中后，进行真空干燥处理，去除制药浸提过程中的有机溶剂残余，利用真空条件尽可能去除水飞蓟素提取过程中残余的有机试剂，同时达到干燥渣粕的目的；

步骤(2)将步骤(1)中干燥后的水飞蓟制药渣粕，经粉碎机研磨粉碎过(10目)筛，得到粒径不大于2mm的水飞蓟渣粕粉；

步骤(3)每克水飞蓟渣粕粉添加0.03-0.05g NaOH，混合均匀，再添加0.005-0.02g维生素C，混合均匀，然后添加10mL纯净水，搅拌均匀后，在20℃到50℃的条件下恒温浸提，且持续搅拌或震荡2-6h；其中，维生素C是浸提还原剂，可有效抑制浸提溶液变棕变黑的进程；

步骤(4)浸提悬浊液离心得到浸提上清液和浸提残渣；

步骤(5)分离步骤(4)的浸提上清液，使用(1mol/L的)盐酸调节pH值至4.0-4.5，室温下静置沉淀0.5-2h，随后离心获得蛋白沉淀I；

步骤(6)分离步骤(4)的浸提液残渣，并对此残渣进行二次浸提，按照每克初始渣粕粉计，向步骤(4)的浸提残渣中添加0.021-0.035g NaOH以及7mL纯净水，混合搅拌均匀后，再添加0.0035-0.014g维生素C，混合搅拌均匀后，在20℃到50℃的条件下恒温搅拌或震荡0.5-2h，进行二次浸提；