[发明专利]抑制或下调GTSE1基因表达的试剂在制备肿瘤放疗增敏药物中的应用

说明书

本发明涉及生物医药工程技术领域，提供了抑制或下调GTSE1基因表达的试剂在制备肿瘤放疗增敏药物中的应用，尤其在制备肺癌放疗增敏药物中的用途。通过实验证实，GTSE1敲低促进了照射对肺癌细胞的DNA损伤，显著增加了三种肺癌细胞的辐射敏感性，并且随着照射剂量的增加，显著增加照后三种肺癌细胞凋亡率，其细胞存活率明显低于正常肺癌细胞组。因此，本发明为提高放射治疗的敏感性提供了新的探索，有助于提高恶性肿瘤的放射敏感性，具备一定的临床应用前景。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及抑制或下调GTSE1基因表达的试剂在制备肿瘤放疗增敏药物中的应用、包含其的载体和药物。

背景技术

肺癌是全球患病率及致死率最高的恶性肿瘤，在中国及其他发展中国家占比达30—40％。近40年来，中国肺癌发病率逐年增高，2015年我国肺癌发病例数已约达78.1万例，居我国国民恶性肿瘤发病率首位。肺癌起病隐匿，恶性程度高，患者五年生存率极低，已成为严重威胁人类健康的恶性肿瘤之一。根据世界卫生组织的数据，肺癌目前是全世界癌症死因的第一名，约占全部恶性肿瘤的19％。全世界每年的新增病例超过120万。在男性肿瘤死因中已居首位，在女性中仅次于乳腺癌居第二位。目前肺癌的主要治疗手段包括手术治疗、放射治疗、化学治疗及靶向治疗。其中，放射治疗是肺癌重要的局部治疗手段。根据放疗的出发点不同，放疗可分为根治性放疗，同步放化疗，姑息性放疗，术前和术后放疗。其中，对于不能耐受或者拒绝手术的早期肺癌患者，放疗是有效的局部治疗手段；对于接受了手术的患者，放疗是重要的辅助治疗手段；对于晚期患者，放疗是重要的姑息治疗手段。但随着放疗方案的实施，肿瘤细胞本身对电离辐射的耐受性逐渐增加，治疗效果很快出现瓶颈，多数患者均会出现不同程度的辐射抵抗，最终导致放疗失败。肿瘤对辐射不敏感或对辐射产生抗拒性，是放射治疗难以根治恶性肿瘤的主要原因之一。

G2/S期应答相关蛋白1(GTSE1)是由人类gtse1基因编码的细胞周期相关蛋白，基因定位于22q13.2-q13.3，编码蛋白由741个氨基酸组成，全长76645Da。该蛋白仅在细胞周期的S和G2期特异性表达，主要分布于细胞质并结合于微管，主要功能是抑制细胞周期G2期向M期转换。在多种DNA损伤刺激因素下，该蛋白还可以穿过核膜积聚在细胞核中，调控肿瘤抑制蛋白p53诱导的细胞凋亡。此外，作为有丝分裂调节因子，GTSE1可以通过抑制微管解聚酶-有丝分裂着丝粒相关驱动蛋白(mitotic centromere-associated kinesin,MCAK)活性调节有丝分裂期间微管稳定性。

目前发现GTSE1在多种肿瘤中高表达，与肿瘤的侵袭和迁移密切相关。肿瘤细胞对多种化疗药物的耐受均与GTSE1的异常高表达有关。但肿瘤细胞对化疗耐受是否也与GTSE1的异常高表达有关并未可知，因此抑制或下调GTSE1基因在制备肿瘤放疗增敏药物中的应用国内外至今无人报道。

发明内容

本发明的目的在于，对GTSE1的异常高表达与肿瘤细胞对化疗耐受之间关系进行研究，提供GTSE1基因抑制剂的新用途，并提供了一种肿瘤放疗增敏药物组合物。

本发明的第一方面，提供了一种抑制或下调GTSE1基因表达的试剂在制备肿瘤放疗增敏药物中的应用。

所述的抑制或下调GTSE1基因表达的试剂为任何能够降低GTSE1基因的稳定性、能够抑制或下调GTSE1的表达或抑制GTSE1基因的转录加工活性的物质，包括但不限于：特异性干扰GTSE1基因表达、加工的小干扰分子，如shRNA分子、siRNA分子、反义核苷酸等；GTSE1的拮抗剂、下调剂、阻滞剂、阻断剂等。优选特异性干扰GTSE1基因表达的干扰RNA分子、短发夹RNA或反义核苷酸，更优选结构简单的干扰RNA分子，该干扰RNA分子可通过购买途径获取。

本发明以肺癌细胞A549、H460和H1299为例进行研究，通过RNA干扰(RNAi)沉默GTSE1基因研究其对肺癌细胞的影响。