[发明专利]基于含氮杂环的中性线粒体荧光标记物及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 202010117779.0 | 申请日： | 2020-02-25 |
| 公开（公告）号： | CN111440143B | 公开（公告）日： | 2021-04-27 |
| 发明（设计）人： | 葛健锋;王越;孙如 | 申请（专利权）人： | 苏州大学 |
| 主分类号： | C07D401/04 | 分类号： | C07D401/04;C07D405/04;C07D413/04;C07D471/04;C09K11/06;G01N21/64 |
| 代理公司： | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人： | 孙周强;陶海锋 |
| 地址： | 215137 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 含氮杂环 中性 线粒体 荧光 标记 及其 制备 方法 应用 | ||
1.基于含氮杂环的中性线粒体荧光标记物，其特征在于，所述基于含氮杂环的中性线粒体荧光标记物为以下化学式中的一种：
、、
其中，X1=X2=N，或者：X1=CH，X2=N，或者：X1=N，X2=CH；M、E、E1、B1独立的选自碳原子数小于6的烷基。
2.根据权利要求1所述基于含氮杂环的中性线粒体荧光标记物，其特征在于，所述基于含氮杂环的中性线粒体荧光标记物为以下化学式中的一种：
X1=X2=N，或者：X1=CH，X2=N，或者：X1=N，X2=CH。
3.权利要求1所述基于含氮杂环的中性线粒体荧光标记物在制备线粒体荧光标记试剂中的应用。
4.一种非疾病诊断用细胞成像方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）化合物6与化合物7反应得到化合物8；化合物8脱保护，得到基于含氮杂环的中性线粒体荧光标记物；
（2）化合物9与化合物7反应得到化合物10；化合物10脱保护，得到基于含氮杂环的中性线粒体荧光标记物；
（3）化合物13与化合物7反应得到化合物14；化合物14脱保护，得到基于含氮杂环的中性线粒体荧光标记物；
（4）将步骤（1）或者步骤（2）制备的基于含氮杂环的中性线粒体荧光标记物与细胞共培养后加入线粒体红色标记物，继续培养后，进行细胞成像；
或者将步骤（3）制备的基于含氮杂环的中性线粒体荧光标记物与细胞共培养后加入线粒体绿色标记物，继续培养后，进行细胞成像；
化合物6的化学结构式如下：
化合物7的化学结构式如下：
X为卤素；
化合物8的化学结构式如下：
化合物9的化学结构式如下：
化合物10的化学结构式如下：
化合物13的化学结构式如下：
化合物14的化学结构式如下：
其中，X1=X2=N，或者：X1=CH，X2=N，或者：X1=N，X2=CH；M、E、E1、B1独立的选自碳原子数小于6的烷基。
5.根据权利要求4所述非疾病诊断用细胞成像方法，其特征在于，脱保护在盐酸存在下进行；化合物6与化合物7的反应在贵金属盐催化剂存在下进行；化合物9与化合物7的反应在贵金属盐催化剂存在下进行；化合物13与化合物7的反应在贵金属盐催化剂存在下进行。
6. 根据权利要求4所述非疾病诊断用细胞成像方法，其特征在于，利用激光共聚焦显微镜进行细胞成像；蓝光通道使用405nm激发，收集410～500 nm范围内的荧光信号；红光通道使用561nm激发，收集570～750 nm范围内的荧光信号；绿光通道使用488 nm激发，收集500～550 nm范围内的荧光信号。
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