[发明专利]一种苯并噻唑衍生物及其合成方法和应用

权利要求书

1.一种苯并噻唑衍生物NSSN，其特征在于，结构式为：

2.如权利要求1所述的一种苯并噻唑衍生物NSSN的合成方法，其特征在于，步骤如下：

(1)按摩尔比为1：1-1.3将2-氨基苯硫酚和5-甲基水杨醛在无水二甲基亚砜中混合，搅拌下加入少量的硝酸银，将混合物在室温反应2小时后，用二氯甲烷稀释，盐水洗涤，合并有机相，减压除去溶剂，以体积比6:1的石油醚和乙酸乙酯作洗脱剂经硅胶柱色谱分离，纯化得浅黄色粉末状产物，即2-(苯并[d]噻唑-2-基)-4-甲基苯酚；

(2)按摩尔比为1：2-2.2将2-(苯并[d]噻唑-2-基)-4-甲基苯酚和六次甲基四胺在三氟乙酸中混合，混合物搅拌回流过夜，然后冷却至室温，用氢氧化钾调节pH直至固体完全沉淀，过滤、洗涤、真空干燥，以体积比5:1的石油醚和乙酸乙酯作洗脱剂经硅胶柱色谱分离，纯化得浅黄色粉末状产物，即为3-(苯并[d]噻唑-2-基)-2-羟基-5-甲基苯甲醛；

(3)按摩尔比为1：2-3将2-甲基苯并噻唑和碘甲烷溶解在无水乙腈中，混合物在氮气保护下搅拌回流24小时，然后冷却至室温，过滤得白色固体即2,3-二甲基苯并噻唑-3-碘化物，未经纯化直接进行下一步；

(4)按摩尔比为1：1-1.2将3-(苯并[d]噻唑-2-基)-2-羟基-5-甲基苯甲醛和2,3-二甲基苯并噻唑-3-碘化物在无水乙醇中混合，加入催化量的哌啶，混合物搅拌回流过夜，然后冷却至室温，过滤、洗涤、真空干燥即得(E)-2-(3-(苯并[d]噻唑-2-基)-2-羟基-5-甲基苯乙烯基)-3-甲基苯并[d]噻唑-3-碘化物(NSSN)。

3.如权利要求2所述的NSSN的合成方法，其特征在于，所述的步骤(1)中2-氨基苯硫酚和5-甲基水杨醛的摩尔比为1：1。

4.如权利要求2所述的NSSN的合成方法，其特征在于，所述的步骤(2)中2-(苯并[d]噻唑-2-基)-4-甲基苯酚和六次甲基四胺的摩尔比为1：2。

5.如权利要求2所述的NSSN的合成方法，其特征在于，所述的步骤(3)中2-甲基苯并噻唑和碘甲烷的摩尔比为1：2.5。

6.如权利要求2所述的NSSN的合成方法，其特征在于，所述的步骤(4)中3-(苯并[d]噻唑-2-基)-2-羟基-5-甲基苯甲醛和2,3-二甲基苯并噻唑-3-碘化物的摩尔比为1：1。

7.如权利要求1所述的一种苯并噻唑衍生物NSSN在次氯酸检测中的应用。

8.一种检测次氯酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)、用二甲基亚砜(DMSO)配制2mM NSSN的荧光探针储备液；

(2)、将2mL的PBS/CH₃CN体积比1:1pH＝7.4的溶液和10μL荧光探针储备液加到一个荧光比色皿中，在荧光分光光度仪上检测，随着次氯酸0-30μM的加入，670nm的荧光强度逐渐减弱，540nm的荧光强度逐渐增强，荧光呈比率型变化；当加入次氯酸30-120μM时，荧光强度由540nm红移到552nm逐渐增强并趋于稳定，荧光呈“turn-on”型变化；

(3)、以次氯酸浓度为横坐标，以荧光强度F_670nm/F_540nm为纵坐标绘制图，得到小浓度次氯酸的工作曲线；线性回归方程为：y＝-0.103x+2.518，x的单位为10^-6mol/L；以次氯酸浓度为横坐标，以荧光强度F_552nm为纵坐标绘制图，得到大浓度次氯酸的工作曲线；线性回归方程为：y＝29.646x-330.3，x的单位为10^-6mol/L。

9.如权利要求1所述的苯并噻唑衍生物NSSN在制备细胞中次氯酸检测试剂中的应用。

10.如权利要求1所述的苯并噻唑衍生物NSSN在制备动物皮下次氯酸检测试剂中的应用。