[发明专利]检测转铁蛋白表达量的试剂在制备肠道免疫耐受失衡疾病诊断试剂或试剂盒中的应用

说明书

本发明提供了检测转铁蛋白表达量的试剂在制备肠道免疫耐受失衡疾病诊断试剂或试剂盒中的应用，属于医学分子生物学技术领域。本发明根据转铁蛋白浓度的高低来诊断肠道炎症疾病发病的严重程度，实现肠道免疫耐受失衡疾病早期诊断的目的。本发明以转铁蛋白作为肠道免疫耐受失衡标志物，特异性和敏感性高，检测方法简单。

技术领域

本发明涉及医学分子生物学技术领域，尤其涉及检测转铁蛋白表达量的试剂在制备肠道免疫耐受失衡疾病诊断试剂或试剂盒中的应用。

背景技术

肠道是接触外界食物抗原、抵抗肠道病原菌和外界抗原感染的第一道防线。肠道中也寄居着大量的肠道菌群。肠道作为人体重要的免疫系统能够高效的识别有害抗原(外界病原菌)和无害抗原(肠道共生菌与食物抗原)，同时，肠道也能够有效的挑战来自肠道微生物代谢的大量的抗原物质(脂多糖、脂磷壁酸和细菌DNA等)的刺激并高效的维持肠道免疫耐受的平衡。肠道免疫耐受的失衡会导致严重的炎症性肠病(inflammatory boweldisease,IBD)的发生。

肠道免疫耐受性树突细胞(CD103⁺CD11b⁺DC)、调节性T细胞(Treg)和调节性B细胞(Treg)等炎症抑制性细胞在维持肠道免疫耐受平衡上发挥着至关重要的作用，但是其分子机制仍然不清楚。目前，临床上还没有非常精准有效的检测肠道免疫失衡相关疾病的标志物。

发明内容

本发明的目的在于提供检测转铁蛋白表达量的试剂在制备肠道免疫耐受失衡疾病诊断试剂或试剂盒中的应用，本发明能够用于精准有效的检测肠道免疫失衡相关疾病。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了检测转铁蛋白表达量的试剂在制备肠道免疫耐受失衡疾病诊断试剂或试剂盒中的应用。

优选的，所述肠道免疫耐受失衡疾病包括溃疡性结肠炎。

本发明提供了一种以转铁蛋白作为标志物的肠道免疫耐受失衡疾病的ELISA诊断试剂盒。

优选的，所述试剂盒包括抗人转铁蛋白特异的兔多克隆抗体。

优选的，所述试剂盒还包括：包孔板、包被液、洗涤液、封闭液、抗兔IgG二抗、显色底物和终止液。

优选的，所述包被液包括磷酸盐缓冲液；所述洗涤液包括磷酸盐吐温缓冲液；所述封闭液包括牛血浆白蛋白溶液，所述牛血浆白蛋白溶液以磷酸缓冲盐溶液作为溶剂；所述显色底物包括3,3,5,5-四甲基联苯胺溶液；所述终止液包括硫酸水溶液。

本发明的有益效果：本发明提供了检测转铁蛋白表达量的试剂在制备肠道免疫耐受失衡疾病诊断试剂或试剂盒中的应用。本发明根据转铁蛋白浓度的高低来诊断肠道炎症疾病发病的严重程度，实现肠道免疫耐受失衡疾病早期诊断的目的。本发明以转铁蛋白作为肠道免疫耐受失衡标志物特异性和敏感性高，检测方法简单。

附图说明

图1为实施例2中溃疡性结肠炎病人和正常人的抗凝血中转铁蛋白的含量；

图2为实施例2中溃疡性结肠炎病人结肠组织中转铁蛋白浓度的western blot实验结果；

图3为实施例2中溃疡性结肠炎病人结肠组织中转铁蛋白浓度的统计结果；

图4为实施例3中普通SPF小鼠和无菌鼠(GF)的肠组织和肠系膜淋巴结各段(十二指肠(D)、空肠(J)、回肠(I)、盲肠(C1)和结肠(C2))转铁蛋白和肠道免疫耐受重要指标(视黄醛脱氢酶ALDH1A2、CCL22、TGF-β1和IL-10)的westernblot实验结果；

图5为实施例3中普通SPF小鼠和无菌鼠(GF)的肠组织和肠系膜淋巴结各段Tf的westernblot统计结果；