[发明专利]一种用于烟草脆裂病毒快速检测的引物组及其快速检测方法在审
| 申请号： | 202010110881.8 | 申请日： | 2020-02-24 |
| 公开（公告）号： | CN111118220A | 公开（公告）日： | 2020-05-08 |
| 发明（设计）人： | 王佳莹;崔俊霞;陈先锋 | 申请（专利权）人： | 宁波检验检疫科学技术研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司： | 宁波诚源专利事务所有限公司 33102 | 代理人： | 陈洪娜;陈蕾 |
| 地址： | 315000 *** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 烟草 病毒 快速 检测 引物 及其 方法 | ||
1.一种用于烟草脆裂病毒快速检测的引物组，其特征在于，所述引物组由下列引物构成：
TRV-F3 GCTTGGAAAGATCTTTTAAAGAAAC，如SEQ ID N0.3所示，
TRV-B3 CGTTCTGAATAACACCGAGA，如SEQ ID N0.4所示，
TRV-FIP GAGAGTGGTCAGCAAACCGGCATAGTGTAAAATTTGCGCTAC，如SEQ ID N0.5所示，
TRV-BIP AGTAGACAGTGTCCTTATTCGCCGCGTTATTAGCACGTGAGT，如SEQ ID N0.6所示，
TRV-LP GTACGAACAGTTTCCTGAAAGAAAG，如SEQ ID N0.7所示。
2.一种应用有如权利要求1所述的引物组的烟草脆裂病毒快速检测方法，其特征在于包括以下步骤：首先将反应液与所述引物组的各引物混合，接着加入模板核酸进行扩增并读取扩增结果。
3.如权利要求2所述的烟草脆裂病毒快速检测方法，其特征在于，可以预先将所述引物组中的各引物固定在芯片上，再将反应液与模板依次加入并混匀。
4.如权利要求3所述的烟草脆裂病毒快速检测方法，其特征在于，将所述引物组中的各引物与琼脂糖溶液按比例混合后取适量点入至芯片的加样孔中，室温下晾干至固态，即完成引物组在芯片上的固定。
5.如权利要求2所述的烟草脆裂病毒快速检测方法，其特征在于，所述反应液为荧光等温扩增预混液。
6.如权利要求5所述的烟草脆裂病毒快速检测方法，其特征在于，所述扩增的条件为：扩增温度为63.5℃，扩增时间为30min，荧光通道为FAM。
7.如权利要求2所述的烟草脆裂病毒快速检测方法，其特征在于，所述引物组中各引物的浓度均为100μM。
8.如权利要求7所述的烟草脆裂病毒快速检测方法，其特征在于，所述引物组中TRV-F3、TRV-B3、TRV-FIP、TRV-BIP以及TRV-LP的体积比为1:1:7:7:2。
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