[发明专利]一种生化反应试管及其使用方法和基因扩增试剂盒

说明书

本发明公开了一种生化反应试管及其使用方法和基因扩增试剂盒，生化反应试管包括管部和盖部，所述管部包括：管体，所述管体包括有第一腔室和第二腔室，所述第二腔室的底部与所述第一腔室的底部具有一定距离；限位单元，所述限位单元设置于所述管体的外侧；其中，当所述盖部封闭所述管部时，所述第一腔室的顶部与所述第二腔室的顶部连通。其优点在于，通过设置第一腔室和第二腔室来放置不同的反应组分及溶液，而且第一腔室和第二腔室的高低位置不同；在实际使用时，仅第一腔室和第二腔室中的一个被独立加热完成生化反应另一个不被加热；将试管垂直翻转180°并进行振荡操作时，第一腔室和第二腔室内的溶液混合并进行进一步反应，以消除有害结果。

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，尤其涉及一种生化反应试管及其使用方法和基因扩增试剂盒。

背景技术

在常规的小型生化反应中，一般是单个的试管内设置一个腔体并放置一种溶液，当需要多个溶液参与反应时，将不同试管的溶液吸取后加入其它反应试管。当存在一些特殊原因如试剂污染时，可在试管内设置一个挡板将试管分隔为两部分，分别将A/B两个溶液放置在同一个试管的不同腔体内，在不开盖的情况下将A/B溶液进行混合反应，避免了试剂外泄污染。

核酸扩增如PCR反应的最大特点是具有较大的扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，当实验室样本和扩增目标经常出现大量相同的情况时，核酸气溶胶污染在实验区域内不断累积，污染风险不断增加，假阳性的发生频率也会越来越高。PCR技术的高扩增效率产生的核酸气溶胶污染，会导致检测结果的假阳性。假阳性意味着实验不可信，并且直接造成实验室经济损失。更严重的是，如果形成气溶胶污染，则可引起整个PCR实验室的污染，甚至要关闭实验室。

PCR扩增产物污染是最主要最常见的污染。极微量的PCR产物污染就可造成假阳性。最可能造成PCR产物污染的形式是气溶胶污染。气溶胶是悬浮于气体介质中粒径一般为0.001μm～1000μm的固体、液体微小粒子形成的胶溶状态散体系。核酸气溶胶即DNA/RNA气溶胶，是分散并悬浮在气体介质中的核酸聚合物，广泛存在于实验室桌面、仪器、耗材以及空气中，据计算一个气溶胶颗粒可含48000拷贝。核酸气溶胶与PCR过程相伴相生，操作时空气与液体面摩擦，离心机离心，剧烈地摇动反应管，反应管开盖，吸样时及移液器的反复吸样，污染物的外泄等途径，都会产生核酸气溶胶。

除了PCR扩增方法外，目前核酸恒温扩增方法也逐步进入实验室。目前主要包括以下几种：环介导恒温扩增(loop－mediated isothermal amplification，LAMP)、切口酶核酸恒温扩增(nicking enzyme mediated amplification，NEMA)、链替代扩增(stranddisplacement amplification，SDA)、滚环扩增(rolling circle amplification，RCA)、依赖解旋酶的恒温基因扩增(helicase－dependent isothermal DNA amplification，HAD)、转录依赖的扩增系统(transcription－based amplification system，TAS)、依赖核酸序列的扩增(NASBA)又称自主序列复制系统(self－sustained sequence replication，3SR)、QB复制酶扩增(Q－beta replicase－amplified assay)等。恒温扩增摆脱了热循环的限制，使其应用范围大大增加，而且目前应用的恒温扩增方法都有较高的敏感性和特异性，在核酸检测中应用范围非常广。但敏感性高会带来扩增物污染和假阳性的问题，从而导致反应结果判读不准确。