[发明专利]结核分枝杆菌LAM的单克隆抗体及其用途

说明书

本发明公开了一种结核分枝杆菌LAM的单克隆抗体及其用途，涉及抗体技术领域。本发明公开的结核分枝杆菌LAM的单克隆抗体，具有轻链可变区和重链可变区,单克隆抗体对LAM的亲和力较高，将其用于检测以LAM作为靶点的分枝杆菌时，具有较高的灵敏度和特异性，为分枝杆菌的LAM检测提供了一种新的抗体选择，也为结核病的诊断提供了一种新的诊断方案。

技术领域

本发明涉及抗体技术领域，具体而言，涉及一种结核分枝杆菌LAM的单克隆抗体及其用途。

背景技术

结核病居单一传染性微生物导致死亡的首位，世界范围内约23％的人群感染了结核分枝杆菌(Mtb)。结核病与其它疾病共存时，例如人免疫缺陷病毒感染，使得治疗更加困难。活动性结核病的早期诊断对于结核病的有效治疗是必需的，Mtb及其组分的发现为结核病快速诊断提供直接证据。虽然细菌培养仍然是结核病诊断的金标准，但检测周期往往较长，且需要专业人员进行操作，检测敏感性也较低。Xpert-MTB/RIF检测是一种高敏感性和高特异性的活动性结核病诊断方法，可在2小时内检出结核分枝杆菌复合群细菌，同时测定结核病常见利福平耐药相关基因突变情况。然而这种检测相对昂贵，且需要技术投资。Mtb特异性抗原检测成为辅助诊断活动性结核病具有吸引力的替代方案。

脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)，一种17.5kDa的糖脂，是结核分枝杆菌细胞壁外表面的一种主要多糖抗原。LAM是一种异质性脂糖，由三部分组成：磷脂酰肌醇甘露糖苷锚定物、多糖主链和末端戴帽结构。依据LAM末端的帽状结构，将LAM分为磷脂酰肌醇LAM(phosphatidylinositol-capped LAM，PILAM)、甘露糖LAM(rnannose-capped LAM，ManLAM)和阿拉伯糖LAM(arabinose-capped LAM，AraLAM)。三种LAM分别存在于不同分枝杆菌中，在细菌的生长致病过程中发挥不同作用。致病性分枝杆菌中富含ManLAM，其可引起宿主强烈的免疫反应，是结核病重要的免疫靶标。

世界卫生组织(WHO)已推介一种商业化尿LAM检测试剂盒(LF-LAM；Determine TB-LAM；Alere,USA)用于艾滋病患者中疑似结核病的筛查，该试剂盒通过兔抗LAM多克隆抗体进行检测。研究者试图在非艾滋病的结核病患者中通过多种方法检测LAM抗原，然而现有的检测试剂其检测敏感性仍较差。

单克隆抗体是免疫诊断领域研发的热点，具有高特异性、高亲和力、抗体均一化和便于生产的优势，鼠抗LAM单克隆抗体(如CS35)是目前国际上公认的抗LAM单克隆抗体，相对于鼠单克隆抗体，兔单克隆抗体能够识别一些特殊抗原表位，增加抗体多样化程度，且兔源抗体往往具有更高的亲和力。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种结核分枝杆菌LAM的单克隆抗体及其用途。本发明提供的抗LAM单克隆抗体对LAM具有较高的亲和力，将其用于检测以LAM作为靶点的分枝杆菌时，具有更高的灵敏度和特异性，为分枝杆菌的检测提供了一种新的抗体选择，也为结核病的诊断提供了一种新的诊断方案。

本发明是这样实现的：

第一方面，本发明实施例提供一种抗LAM单克隆抗体或其抗原结合片段，其具有轻链可变区和重链可变区；

其中，轻链可变区各互补决定区的氨基酸序列如下：

LCDR1(轻链互补决定区1):QASHSVYGNNELS(SEQ ID NO.1)；

LCDR2:KASTLAS(SEQ ID NO.2)；

LCDR3:QGGYWGNRA(SEQ ID NO.3)；

重链可变区各互补决定区的氨基酸序列如下：

HCDR1(重链互补决定区1):NYDMG(SEQ ID NO.4)；