[发明专利]一种多功能细胞-蛋白检测方法及检测装置

说明书

本发明涉及一种多功能细胞‑蛋白检测方法及检测装置，该方法应用流式荧光分析技术，对待测样本集成实现血液细胞分析、基于微球的蛋白分子分析和细胞特征抗原分子分析；并且，血液细胞分析为基于微球的蛋白分子分析和细胞特征抗原分子分析提供基础数据，用于检测结果的校正和样品反应的优化。与现有技术相比，本发明具有多功能一体化、全血样本快速检测、检测结果准确校正和反应优化等优点。

技术领域

本发明涉及生物分析检测领域，尤其是涉及一种多功能细胞-蛋白检测方法及检测装置。

背景技术

在临床疾病诊断中，血液细胞分析、可溶性蛋白分子分析、细胞特征抗原分子分析是常用的检测项目，它们分别从不同角度提供了重要的诊断信息。

随着医学的进步和诊断水平的提高，对于很多疾病的诊断，需要结合多种检测结果进行综合判断。例如，感染炎症需要检测白细胞分类计数和CRP、PCT等特征蛋白数量，免疫系统疾病需要检测白细胞分类计数、细胞表面特征抗原CD4细胞绝对计数和某些特征蛋白数量。

现在，血液细胞分析通常在全自动血液细胞分析仪上进行检测；细胞特征抗原分子分析通常在流式细胞分析仪上进行检测；可溶性蛋白分子分析通常在生化分析仪、化学发光分析仪或特定蛋白分析仪等装置上进行检测，三种检测项目分别在不同的仪器上进行检测，由于这些检测项目是在单独的装置上分别进行的，这样需要消耗的样本量大，检测的时间长。

目前临床上大量使用的可溶性蛋白分子分析通常使用血清或血浆样品，在生化分析仪、化学发光分析仪等装置上进行检测，但制备血清或血浆，需要凝血和离心操作，消耗很多时间和人力。

针对急性病症，特征蛋白的快速检测使用全血样本，如特定蛋白分析仪，但特定蛋白分析仪通常使用免疫比浊法，如免疫透射或免疫散射比浊法，由于检测原理的限制，比浊法的检测灵敏度和精密度都不高。

在免疫血清学检测中，如生化免疫分析和化学发光免疫分析，原始全血样本需先进行静置和离心处理，分离血浆和血细胞，因此待测样本中不包含血细胞，检测得出的结果则是待测目标物数量/uL血清。

若使用全血样本检测可溶性蛋白分子，得出的结果是待测目标物数量/uL全血，这样与免疫血清学检测的结果不能对等比较，因此必须用血细胞的体积信息对全血样本的检测结果进行校正。血细胞占全血样本的体积比例称为细胞压积，如图11所示，通常细胞压积为40-50％，但婴幼儿的细胞压积变化很大，有的可达70％。现在使用原始全血样本进行免疫分析的仪器，通常使用40％作为缺省值进行血细胞体积校正，这样有很大误差。为得到血细胞体积的精确信息，还需另外使用血液细胞分析仪获得细胞压积数据。

目前在临床诊断中，细胞特征抗原CD4细胞绝对计数分析是免疫系统疾病检测的核心判断指标。细胞特征抗原分析，通常使用流式细胞分析仪进行检测，只能给出特征抗原细胞的比例信息，如CD4细胞占整个淋巴细胞的百分比，而不能给出CD4细胞的绝对数量(个数/uL全血样本)。通常为得到白细胞或淋巴细胞的绝对数量信息，则需要另外使用血液细胞分析仪检测得到。

细胞特征抗原分析中，抗原与抗体进行特异性结合反应。为了达到最佳的信噪比，加入的抗体数量有一个最优的比例范围，优选地，样本的白细胞计数应小于10.0*10^9/L，若白细胞计数10.0*10^9/L，样本需要进行稀释，通常为得到白细胞或淋巴细胞的绝对数量信息，需要另外使用血液细胞分析仪。

发明内容

本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种多功能细胞-蛋白检测方法及检测装置。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

一种多功能细胞-蛋白检测方法，应用流式荧光分析技术，对待测样本集成实现血液细胞分析、基于微球的蛋白分子分析和细胞特征抗原分子分析；