[发明专利]用以制备虾红素的重组多核苷酸序列及其应用

权利要求书

1.一种用以制备虾红素、虾红素的前驱物或虾红素的衍生物的重组多核苷酸序列，包含：

第一基因组，其包含第一启动子及可操作式地连结至该第一启动子的第一核酸序列，其中该第一核酸序列用以编码焦磷酸香叶香叶酯合成酶；

第二基因组，其包含第二启动子及可操作式地连结至该第二启动子的第二核酸序列，其中该第二核酸序列用以编码3-羟基-3-甲基戊二酰-辅酶A还原酶；

第三基因组，其包含第三启动子及可操作式地连结至该第三启动子的第三核酸序列，其中该第三核酸序列用以编码八氢茄红素去饱合酶；以及

第四基因组，其包含第四启动子及可操作式地连结至该第四启动子的第四核酸序列，其中该第四核酸序列用以编码具有八氢茄红素合成酶和茄红素环化酶个别功能的双功能酶；

其中该重组多核苷酸序列的各基因组的3’端与位于其下游的下一组基因组的5’端系为相互同源；且该第一、第二、第三和第四核酸序列分别包含序列编号：1、2、3和4的序列。

2.根据权利要求1所述的重组多核苷酸序列，其中

该虾红素可以是3S、3S’-虾红素或3R、3R’-虾红素；

该虾红素的前驱物可以是焦磷酸香叶香叶酯、尼基叶黄素、茄红素、海胆酮、斑螯黄质、八氢番茄红素、玉米黄质、β-隐黄素或β-胡萝卜素；以及

该虾红素的衍生物可以是虾红素单酯体或虾红素双酯体。

3.根据权利要求1所述的重组多核苷酸序列，进一步包含：

第五基因组，其包含第五启动子及可操作式地连结至该第五启动子的第五核酸序列，其中该第五核酸序列用以编码β-胡萝卜素羟化酶；以及

第六基因组，其包含第六启动子及可操作式地连结至该第六启动子的第六核酸序列，其中该第六核酸序列用以编码β-胡萝卜素酮醇酶。

4.根据权利要求3所述的重组多核苷酸序列，其中该第五核酸序列包含序列编号：5、6或7的序列，且该第六核酸序列包含序列编号：8的序列。

5.根据权利要求4所述的重组多核苷酸序列，其中该第一至第六启动子系为不同的启动子。

6.根据权利要求1所述的重组多核苷酸序列，进一步包含：

第七基因组，包含第七启动子及可操作式地连结至该第七启动子的第七核酸序列，其中该第七核酸序列用以编码P450还原酶；以及

第八基因组，包含第八启动子及可操作式地连结至该第八启动子的第八核酸序列，其中该第八核酸序列用以编码β-胡萝卜素加氧酶。

7.根据权利要求6所述的重组多核苷酸序列，其中该第七核酸序列包含序列编号：9的序列，且该第八核酸序列包含序列编号：10的序列。

8.根据权利要求6所述的重组多核苷酸序列，其中该第一、第二、第三、第四、第七和第八启动子为不同的启动子。

9.一种用以制备虾红素、虾红素的前驱物或虾红素的衍生物的方法，包含：

(1)将权利要求1-8所述的任一种重组多核苷酸序列引入宿主细胞；以及

(2)将该宿主细胞培养于培养液中，其中该培养液包含一种选自由葡萄糖、半乳糖、甘油和脂肪酸所组成的群组的成分。

10.根据权利要求1所述的方法，其中该培养液包含0.5-40％甘油。

11.根据权利要求10所述的方法，其中该培养液包含0.001％-5％脂肪酸。

12.一种用以改善宿主细胞对压力的耐受性的方法，包含将权利要求1-8所述的任一种重组多核苷酸序列引入至该宿主细胞。

13.根据权利要求12所述的方法，其中该压力是由乙醇、异丁醇、紫外光照射、糠醛(furfural)或药物前驱物所产生。