[发明专利]一种利用RRAD遗传标记检测牛胴体和肉质性状的方法

权利要求书

1.RRAD基因的单核苷酸多态性作为牛肉质和胴体性状分子标记中的用途，其特征在于：上述基因的单核苷酸多态性位点SNP1为牛RRAD基因的3’UTR的198bp处，单核苷酸多态性位点3’UTR-198 GA。

2.一种RRAD基因单核苷酸多态性作为牛肉质性状分子标记的检测方法，包括以下步骤：

第一步：采集需要检测的牛的全血或组织样品，用牛的全血或组织样品进行基因组DNA提取；

第二步：根据RRAD基因序列和权利要求1中单核苷酸多态性位点SNP1所处基因的位置特征，设计合成1对特异性PCR引物如下：

RRAD-F：５’ACCCACTCACCTTTTGCTTAC３’；

RRAD-R：５’GAGTCCTCTCCCCATTCACA３’；

第三步：以牛基因组DNA为模板，使用上一步合成的引物进行PCR扩增获得包含牛RRAD基因目的片段的PCR产物；

PCR反应体系：Taq PCR Mix 10μL，上游引物及下游引物各 0.5μL，混池DNA /个体DNA2μL，去离子水7μL，共20 μL充分混匀用于PCR扩增；PCR反应程序为：95 ℃预变性5min，95℃变性30 s，60℃退火30 s，72℃延伸1 min，循环35次；延伸72℃ 10 min；4℃保存；利用琼脂糖凝胶电泳检查PCR扩增产物片段长度和质量，4℃或-20℃备用；第四步：采用DNA测序技术对PCR产物进行测序，使用序列分析软件查找测序结果中RRAD基因3’非翻译区SNP位点的位置，根据权利要求1中RRAD基因的分子标记SNP1，对检测的牛群体或个体样品进行基因型分析，即GG基因型、GA基因型或AA基因型，最后通过基因型评估和预测牛的胴体和肉质性状。