[发明专利]一种麦李腋芽诱导及继代增殖培养方法

说明书

本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种麦李腋芽诱导及继代增殖培养方法，包括以下步骤：（1）以麦李当年生嫩枝条为外植体，用质量分数为0.08%~0.12%升汞和吐温的混合溶液对外植体进行杀菌消毒处理；（2）将外植体接种到腋芽诱导培养基上，腋芽诱导培养基包括WPM+6‑BA 1.5~2.5mg/L+2、4‑D 0.4~0.6 mg/L；（3）在腋芽分化、嫩枝生长到2~3cm后将其切下接种到继代增殖培养基上，继代增殖培养基包括MS+6‑BA 1.0~2.0mg/L，扩繁增殖系数达8~12。本发明通过优化外植体消毒处理和腋芽诱导、继代增殖培养基配方，能在短时间内获得大量长势健壮的麦李无菌组培苗，扩繁增殖率高，良品率高，组培方法易于操作，提高了繁殖速度和苗的整齐度，并提高性状稳定性，降低育苗成本。

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种麦李腋芽诱导及继代增殖培养方法。

技术背景

麦李，蔷薇科樱属，落叶灌木，高达2米，叶卵状长椭圆形至椭圆状披针形，长5~8厘米，先端急尖而常圆钝，基部广楔形，缘有细钝齿，两面无毛或背面中肋疏生柔毛；叶柄长4~6毫米。花粉红或近白色，径约2厘米，花梗长约1厘米。果近球形，径1~1.5厘米，红色。麦李有一定耐寒性适应性强，喜光，较耐寒，适应性强，甚为美观，各地庭园常见栽培观赏宜于草坪、路边、假山旁及林缘丛栽，也可作基础栽植、盆栽或催花、切花材料。生于山坡、沟边或灌丛中，也有庭园栽培，海拔800~2300米，分布于中国和日本，有很高的园艺观赏价值。常用分株或嫁接法繁殖，砧木用山桃，扦插繁殖，主要夏季半成熟枝插易成活，但是成活率不高，优质商品苗少。近年来，随着植物组织培养技术的发展与成熟，组织培养成为快速大量繁殖苗木、获得性状整齐生长健壮的商品苗的首选技术手段。各类植物的组织培养体系亟待开发。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术的不足，提供了一种麦李腋芽诱导及继代增殖培养方法。本发明通过优化外植体消毒处理和腋芽诱导、继代增殖培养基配方，能在短时间内获得大量长势健壮的麦李无菌组培苗，扩繁增殖率高，良品率高，组培方法易于操作，提高了繁殖速度和苗的整齐度，并提高性状稳定性，降低育苗成本，从而为建立高效的麦李快速繁殖工厂化生产体系奠定基础，也对麦李种质资源离体保存具有重要意义。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种麦李腋芽诱导及继代增殖培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）外植体消毒处理：选取当年生嫩枝条为外植体，去除外植体的叶片，洗去表面杂质，切去伤口位置，对外植体进行消毒，将消毒完的外植体切成小段接种到配制好的培养基上培养观察5~9天；

（2）腋芽的诱导：将切成小段的无菌外植体接种到腋芽诱导培养基上，7~15天后，腋芽部位开始膨大，出现绿色突起，15~25天后腋芽分化生长，再培养15~25天，小的嫩枝条长到2~3cm，将嫩枝条切下转入嫩枝条继代增殖培养基中进行继代增殖培养，确保嫩枝条生长迅速且无玻璃化等不良现象，在培养基中生长发育良好；

（3）继代增殖培养：将诱导的嫩枝条接种到继代增殖培养基上，培养25~30天后筛选出无根、侧枝多、增殖系数较高的增殖母苗，其扩繁增殖系数达8~12。

所述外植体消毒时采用质量分数为0.08%~0.12%的升汞和吐温的混合溶液，浸泡消毒时间6~10分钟，无菌水冲洗4~6次。

所述腋芽诱导培养基包括WPM+6-BA 1.5~2.5mg/L+2、4-D 0.4~0.6 mg/L。

所述继代增殖培养基包括 MS+6-BA 1~2mg/L。

所述腋芽诱导培养基和继代增殖培养基还包括蔗糖26~30g/L、琼脂粉4~6g/L，培养基pH为5.8~6.2，培养温度22~26℃，光照1500~3500lx。

与现有技术相比，本发明具有以下优点：