[发明专利]一种检测SARS-COV-2病毒的恒温扩增试剂盒及引物探针组在审
| 申请号: | 202010094323.7 | 申请日: | 2020-02-15 |
| 公开(公告)号: | CN111074007A | 公开(公告)日: | 2020-04-28 |
| 发明(设计)人: | 方圆;宋泽世;蔡青青;郏肯特;田西西 | 申请(专利权)人: | 上海迪飞医学检验实验室有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京维正专利代理有限公司 11508 | 代理人: | 谢绪宁;薛赟 |
| 地址: | 200135 上海市浦*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 检测 sars cov 病毒 恒温 扩增 试剂盒 引物 探针 | ||
1.一种检测SARS-COV-2病毒的恒温扩增引物探针组,其特征在于,
正向引物为:5’-gatccacagacacttgagattcttgacattac-3’;
反向引物为:5’-cattagaacctgtagaataaacacgccaag-3’;
探针序列为:5’-AACAAATACTTCTAACCAGGTTGCTGTTCTT/idsp/ ATCAGGATGTTAACT-3’block,其中5’端标记抗原基团,3’端连接封闭基团。
2.权利要求1所述检测SARS-COV-2病毒的恒温扩增引物探针组在制备检测SARS-COV-2病毒的恒温扩增试剂盒中的应用。
3.一种检测SARS-COV-2病毒的恒温扩增试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括:
(1)灭活裂解液;
(2)恒温扩增体系:反应缓冲液BufferA、醋酸镁BufferB、阴性对照、无核酸酶水、权利要求1所述引物探针组和RAA酶。
4.根据权利要求3所述一种检测SARS-COV-2病毒的恒温扩增试剂盒,其特征在于,所述灭活裂解液包括摩尔浓度为0.01-0.1M 的NaOH,体积比为0.1%-0.5%的 TWEEN-20,体积比0.1%-1% 的Triton X-100。
5.根据权利要求4所述一种检测SARS-COV-2病毒的恒温扩增试剂盒,其特征在于,所述灭活裂解液包括摩尔浓度为0.01M的 NaOH,体积比为0.5% 的TWEEN-20,体积比为0.1%的Triton X-100。
6.根据权利要求3所述一种检测SARS-COV-2病毒的恒温扩增试剂盒,其特征在于,所述恒温扩增体系中引物探针组和RAA酶制成干粉态。
7.根据权利要求3所述一种检测SARS-COV-2病毒的恒温扩增试剂盒,其特征在于,所述RAA酶包括逆转录酶,链置换DNA聚合酶,重组酶,单链DNA结合蛋白,NFO酶。
8.根据权利要求3所述一种检测SARS-COV-2病毒的恒温扩增试剂盒,其特征在于,所述BufferA包括摩尔浓度为50 mM 的Tris pH 8.4, 80 mM 的Potassium acetate, 10 mM的Magnesium acetate, 1 mM的DTT, 3 mM 的ATP ,20 mM 的Phosphocreatine, 100 ng/ul的Creatine kinase和质量浓度为5%的 PEG compound。
9.根据权利要求3所述一种检测SARS-COV-2病毒的恒温扩增试剂盒,其特征在于,所述BufferB包括摩尔浓度为250mM的醋酸镁。
10.根据权利要求3所述一种检测SARS-COV-2病毒的恒温扩增试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括核酸检测试纸条。
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