[发明专利]一种检测玉米赤霉烯酮的比率荧光适配体传感器的制备方法

权利要求书

1.一种检测玉米赤霉烯酮的比率荧光适配体传感器的制备方法，其特征在于包含步骤如下：

(1)合成CdTe QDs；

(2)合成CdTe@SiO₂，并制成溶液备用；

(3)合成NGQDs；

(4)NGQDs的羧基与ZEN适配体修饰的氨基之间发生酰胺反应合成NGQDs-aptamer：

按比例将步骤(3)制备的NGQDs和PBS溶液混合搅拌，在搅拌下缓慢加入ZEN适配体溶液，并将混合物溶液连续搅拌一定时间后，制得NGQDs-aptamer，在一定温度下储存备用；

(5)混合CdTe@SiO₂和NGQDs-aptamer；

按比例将步骤(2)制备的CdTe@SiO₂溶液和步骤(4)制备的NGQDs-aptamer溶液混合，用PBS溶液调节pH后，得到比率荧光探针混合溶液；

(6)添加MTX；

按比例在步骤(5)制得的比率荧光探针混合溶液中加入米托蒽醌MTX溶液，作用一段时间后得到检测ZEN的比率荧光适配体传感器。

2.根据权利要求1所述的一种检测玉米赤霉烯酮的比率荧光适配体传感器的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，合成CdTe QDs的具体方法为：在剧烈搅拌下，将0.1142gCdCl₂·2.5H₂O溶于50mL水中，加入75μL巯基丙酸，然后用1mol L^-1NaOH将溶液的pH调至8.5，通氮气15min；接着，快速加入2mL用0.0646g Te和0.0457g NaBH₄合成的前驱体NaHTe溶液；接着通氮气10min后将混合溶液倒入三口烧瓶中，在100℃下回流20h，得到发射波长为665nm的红色CdTe QDs，并加入等体积乙醇离心去除杂质；烘干称重后溶于二次水中，并在4℃下储存。

3.根据权利要求1所述的一种检测玉米赤霉烯酮的比率荧光适配体传感器的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，合成CdTe@SiO₂的具体方法为：将1mL 10μM CdTe QDs溶液与6mL乙醇混合，并在室温下搅拌5min；随后，添加20μL APTES，并将混合物溶液连续搅拌6h；按顺序分别添加100μL TEOS和NH₃·H₂O后搅拌24h；最后，将产物用乙醇和水离心洗涤三次后烘干，得到CdTe@SiO₂。

4.根据权利要求1所述的一种检测玉米赤霉烯酮的比率荧光适配体传感器的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，合成NGQDs的具体方法为：将2g柠檬酸铵和60mL H₂O在三口烧瓶中混合，并加热到200℃，此处注意将气球套在冷凝器的出口上方；回流30min后，溶液从无色变为亮黄色，表明粗产物已形成；用1mg mL^-1NaOH调节粗产物的pH至7.0，得到NGQDs，保存在4℃下备用。

5.根据权利要求1所述的一种检测玉米赤霉烯酮的比率荧光适配体传感器的制备方法，其特征在于：步骤(4)中，NGQDs和PBS的体积比为2:1，混合搅拌的时间为15-30min，其中，NGQDs浓度为10mg·mL^-1，PBS浓度为100mM，其中PBS溶液的pH＝7.4，含有10mM EDC和5mMNHS；NGQDs与ZEN适配体溶液的体积比为1:1；其中，ZEN适配体溶液的浓度为1μM；混合物溶液连续搅拌的时间为2-4h；制得的NGQDs-aptamer储存温度为4℃。

6.根据权利要求1所述的一种检测玉米赤霉烯酮的比率荧光适配体传感器的制备方法，其特征在于：步骤(5)中，CdTe@SiO₂溶液和NGQDs-aptamer溶液的体积比是5:1，CdTe@SiO₂溶液浓度为1mg·mL^-1，NGQDs-aptamer的浓度为4mg·mL^-1，用PBS溶液调节pH到7.4。

7.根据权利要求1所述的一种检测玉米赤霉烯酮的比率荧光适配体传感器的制备方法，其特征在于：步骤(6)中，比率荧光探针混合溶液与MTX溶液的体积比是9:1，MTX溶液的浓度为10μM，作用时间为5-20min。