[发明专利]一株自然适应体外细胞培养的鸡传染性法氏囊病病毒经典株及其应用有效
申请号: | 202010090643.5 | 申请日: | 2020-02-13 |
公开(公告)号: | CN111235117B | 公开(公告)日: | 2021-08-27 |
发明(设计)人: | 祁小乐;王笑梅;高玉龙;高立;李凯;崔红玉;刘长军;潘青;张艳萍 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) |
主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00;A61K39/12;A61P31/14;C12R1/93 |
代理公司: | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人: | 马鑫 |
地址: | 150009 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 自然 适应 体外 细胞培养 传染性 法氏囊病 病毒 经典 及其 应用 | ||
1.一株自然适应体外细胞培养的鸡传染性法氏囊病病毒经典株,命名为IBD17JL01,保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址在北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,保藏编号为CGMCC No.19291,保藏时间为2020年01月08日。
2.权利要求1所述的鸡传染性法氏囊病病毒经典株在制备鸡传染性法氏囊病疫苗中的应用。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于,所述的疫苗为灭活疫苗。
4.一种培养权利要求1所述的鸡传染性法氏囊病病毒经典株的方法,其特征在于,包括以下步骤:
将DF1细胞按1MOI的量接种权利要求1所述的鸡传染性法氏囊病病毒经典株IBD17JL01;接毒后补加含2% v/v胎牛血清的DMEM培养基,继续置于37℃培养,接毒后60h,将细胞反复冻融三次,收集细胞悬液即为所述的鸡传染性法氏囊病病毒经典株的病毒液。
5.一种鸡传染性法氏囊病灭活疫苗,其特征在于,所述的灭活疫苗中含有灭活后的权利要求1所述的鸡传染性法氏囊病病毒经典株。
6.如权利要求5所述的鸡传染性法氏囊病灭活疫苗,其特征在于,所述的灭活是将权利要求1所述的鸡传染性法氏囊病病毒经典株的生产用毒置冰上使其缓慢融化,加入甲醛溶液至终浓度为0.2% v/v,混匀后,置于37℃灭活48h,期间不断摇匀,得到灭活后的鸡传染性法氏囊病病毒经典株的病毒液。
7.如权利要求6所述的鸡传染性法氏囊病灭活疫苗,其特征在于,灭活完成后,将灭活后的病毒液与白油佐剂混合后进行乳化,按照体积比计算,白油:病毒液:吐温=50:25:1,使用乳化器乳化,直到混合物外观呈乳白色乳剂。
8.如权利要求5所述的鸡传染性法氏囊病灭活疫苗,其特征在于, 所述的灭活苗中,每羽份含抗原量为不低于8×107 PFU。
9.权利要求5-8任一项所述的鸡传染性法氏囊病灭活疫苗在制备预防鸡传染性法氏囊病药物中的应用。
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