[发明专利]一种新型冠状病毒IgA抗体快速检测试纸条的制备方法在审
| 申请号: | 202010083400.9 | 申请日: | 2020-02-09 |
| 公开(公告)号: | CN111233985A | 公开(公告)日: | 2020-06-05 |
| 发明(设计)人: | 周裕军;周建平;何昆仑;田亚平 | 申请(专利权)人: | 北京丹大生物技术有限公司 |
| 主分类号: | C07K14/165 | 分类号: | C07K14/165;G01N33/569;G01N33/558;G01N33/543;G01N33/546 |
| 代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 董大媛 |
| 地址: | 100071 北京市通州区中关村科技园区通州园光机*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 新型 冠状病毒 iga 抗体 快速 检测 试纸 制备 方法 | ||
1.一种检测新型冠状病毒2019-nCoV IgA抗体的重组蛋白,其特征在于,所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.一种检测新型冠状病毒2019-nCoV IgA抗体的试纸条,包括底板以及依次搭接粘贴在底板上的样品吸收垫、荧光微球垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,其特征在于,所述荧光微球垫喷涂有荧光微球标记的2019新型冠状病毒特异性抗原,所述硝酸纤维素膜上固定有检测区和质控区,所述检测区喷涂有抗人IgA抗体,所述质控区喷涂有羊抗鸡IgY抗体;所述2019新型冠状病毒特异性抗原为权利要求1中所述的重组蛋白。
3.根据权利要求2所述的试纸条,其特征在于,所述试纸条检测的样本为唾液样本。
4.根据权利要求2或3所述的试纸条,其特征在于,所述试纸条还包括样本稀释液;所述样本稀释液包括PB溶液和Tween-20;所述PB溶液的浓度为0.008~0.012mol/L;所述样本稀释液中Tween-20的体积含量为0.4%~0.6%。
5.根据权利要求2所述的试纸条,其特征在于,所述荧光微球为聚苯乙烯包裹稀土离子Eu+的微球,所述荧光微球表面有氨基基团;所述荧光微球的直径为100~300nm。
6.根据权利要求5所述的试纸条,其特征在于,所述荧光微球的氨基基团与重组蛋白的巯基通过交联剂偶联。
7.根据权利要求2所述的试纸条,其特征在于,所述抗人IgA抗体包括羊抗人IgA多克隆抗体、鼠抗人IgA单克隆抗体、兔抗人IgA多克隆抗体和兔抗人IgA单克隆抗体中的一种。
8.权利要求2~7任意一项所述的试纸条的制备方法,包括以下步骤:
1)将荧光微球活化后,与所述重组蛋白混合偶联获得荧光微球标记的2019新型冠状病毒特异性抗原;
2)将所述荧光微球标记的2019新型冠状病毒特异性抗原喷涂至玻璃纤维膜上获得荧光微球垫;
3)将抗人IgA抗体和羊抗鸡IgY抗体分别喷涂在硝酸纤维素膜的检测区和质控区获得固定有检测区和质控区的硝酸纤维素膜;
(4)在底板上依次搭接地粘贴样品吸收垫、荧光微球垫、固定有检测区和质控区的硝酸纤维素膜、以及吸水垫获得试纸条。
9.根据权利要求8所述的制备方法,其特征在于,步骤1)中所述荧光微球活化为将所述荧光微球、交联剂和活化缓冲液混合震荡活化20~40min。
10.权利要求1所述的重组蛋白、权利要求2~7任意一项所述的试纸条在制备2019新型冠状病毒检测试剂中的应用。
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