[发明专利]一种测定肉中瓜尔胶的分析方法

说明书

本发明涉及一种测定肉中瓜尔胶的分析方法，采用三氟乙酸对添加瓜尔胶的畜肉进行降解；然后通过高分辨率质谱对水解液扫描，并结合空白畜肉结果，进行差异组分查找，确定瓜尔胶水解后的特征标志物离子；在此基础上，进一步的利用串联质谱，获得特征标志物离子的多重反应监测定性和定量的离子对，完成基于高效液相色谱‑串联质谱的瓜尔胶分析方法的建立。

技术领域

本发明涉及一种测定肉中瓜尔胶的分析方法，属于食品安全和食品分析检测领域。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

瓜尔胶是从瓜尔豆中提取的一种天然的多糖，其主链由(1-4)β-D-甘露糖为结构单元连接，侧链为α-D-半乳糖组成，通过(1-6)糖苷键与主链相接。作为一种广泛使用的食品添加剂，瓜尔胶在肉制品中主要用作增稠剂、粘合剂和持水剂。因瓜尔胶价格低廉，近年来成为目前世界上最应用广泛的亲水性胶体之一。由于肉价的不断攀升，不法分子通过对牲畜屠宰前泵注或者生鲜肉直接注入的方式，制售含有瓜尔胶的畜鲜肉或者冻肉(“注胶肉”)。该行为不仅涉嫌行业欺诈，而且注胶肉可能会通过胶水引入致病微生物和外源性有害物质污染，如防腐剂、重金属、色素等。

目前国内外关于瓜尔胶的注胶肉尚无相关的检测标准或者规范。虽然水分质量分数在相关标准中作为部分畜肉的判断标准之一，但是仅通过水分测定无法判断注水肉与注胶肉。低场核磁共振技术可以提供肉中水分的存在状态和分布方式，实现注胶成分的分段预测。近红外光谱技术通过大样本量实验，结合主成分分析、判别分析、结合最小二乘法等化学计量学手段，可以实现注胶肉的判别。以上两种方法虽然操作相对简单，但是其结果的准确性严重的依赖于判别模型，其判定注入胶的参数不明确，无法作为定性和定量的依据在执法检测中应用。

因此，急需建立畜禽肉中瓜尔胶的检测方法，满足检测和执法需求，遏制畜禽肉注瓜尔胶不法行为，保障食品安全。

发明内容

本发明要解决的技术问题在于针对现有技术中的缺陷，提供一种测定肉中瓜尔胶的分析方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种测定肉中瓜尔胶的分析方法，包括以下步骤：

1)将待分析肉样品研磨后用1.5～2.5mol/L的三氟乙酸水溶液在温度75～85℃条件下降解25～35min，其中，样品与三氟乙酸水溶液的投料比例为1g：1mL；降解结束后，冷却，离心得到上清水解液；取上清水解液按照1:1～1.5体积比加入甲醇洗涤后在75℃条件下氮吹至干，重复数次直至pH为中性，用水复溶后，经0.22μm水相滤膜过滤，得到待分析降解液；

2)基于高效液相色谱-串联质谱对待分析降解液进行分析，选取粒径为5.0μm，柱长为150mm，柱内径为2.1mm的HILIC柱作为色谱柱；其中，液相色谱条件为：

进样量：10μL；

柱流速：0.5mL/min；

柱温:30℃；

质谱条件为：离子源：电喷雾离子源(ESI)；扫描方式：负离子模式；检测方式：多反应监测；毛细管温度：300℃；毛细管电压：-3500V；脱溶剂气温度：350℃；壳气流速：50psi；辅助气流速：30psi。

3)获得特征标志物离子的多重反应监测定性和定量的离子对，完成基于高效液相色谱-串联质谱的瓜尔胶分析方法的建立。

按上述方案，在步骤1)中，所述降解在封闭反应容器中进行并伴有涡旋。

按上述方案，在步骤2)中，还包括采用流动相进行洗脱以获得更优的分离效果，所述流动相由A相和B相组成，A相为水，B相为乙腈。