[发明专利]小柴胡汤对GABRA1、GABRB2受体靶标的作用

说明书

本申请涉及小柴胡汤对GABRA1、GABRB2受体靶标的作用的研究，具体涉及小柴胡汤对GABRA1、GABRB2受体具有上调作用，以及小柴胡汤制备成中药现代化研究中增强GABRA1、GABRB2受体表达的阳性对照药。

本申请为了克服发明专利的单一性问题，将小柴胡汤治疗失眠的两类靶标分别申请专利。申请涉及小柴胡汤对GABRA1、GABRB2受体靶标的作用。

技术领域：本申请涉及中药复方现代化研究，具体涉及中药复方小柴胡汤作用靶标的研究。

背景技术：

失眠，属于中医学中“不寐”“目不瞑”等范畴，在现代医学中指频繁且持续的入睡困难和(或)睡眠维持困难并导致睡眠感不满意的睡眠障碍，其严重影响失眠患者的生活和工作效率，并给个人、家庭及社会带来严重的负担。失眠病因较多，凡可致阴阳不交，心神受扰，魂无所藏者，皆可导致失眠的发生，但其主要有饮食不节、情志失常、劳逸失调、病后体虚等。

中医药是中国传统医学，小柴胡汤是张仲景《伤寒论》的经典代表方剂，由柴胡、黄芩、人参、半夏、炙甘草、生姜、大枣等7味药组成。小柴胡汤是少阳病的主方，主要功效为和解少阳，和胃降逆，扶正祛邪。此方在千百年的流传中，被广泛地应用于临床各科，均有卓越疗效。小柴胡汤对肝郁化火型失眠症、慢性失眠症、失眠阴虚肝郁痰扰症、肝郁气滞型失眠症和围绝经期失眠具有一定的治疗效果。小柴胡汤临床用于治疗失眠效果显著，但目前没有其治疗失眠分子机制的研究，也没有对小柴胡中的物质基础进行研究。

发明内容：

本申请通过研究，发现了小柴胡汤治疗失眠的靶点，以及作用于靶点的药效物质基础。具体而言，本申请发明内容如下：

(1)小柴胡汤在制备治疗失眠的药物中的应用；

(2)小柴胡汤在制备增强GABRA1、GABRB2受体表达的应用

(3)小柴胡汤在制备GABRA1、GABRB2受体试剂中的应用；

(4)小柴胡汤在制备GABRA1、GABRB2受体阳性对照药中应用；

其中，小柴胡汤柴胡、黄芩、人参、半夏、炙甘草、生姜、大枣7味药组成。

小柴胡汤的用量为柴胡30g，黄芩9g、人参9g、半夏9g、炙甘草9g、生姜9g，大枣4枚。

小柴胡汤的制备方法为，取柴胡30g，黄芩9g、人参9g、半夏9g、炙甘草9g、生姜9g，大枣4枚备用；加入上述药味重量3倍量的水，煎煮2次，每次1-2小时；合并滤液，浓缩至稠膏。

具体实施方式：

实施例1：小柴胡汤的制备

取柴胡30g，黄芩9g、人参9g、半夏9g、炙甘草9g、生姜9g，大枣4枚备用；加入上述药味重量3倍量的水，煎煮2次，每次1-2小时；合并滤液，浓缩至稠膏。

实施例2-效果实验：

取健康大鼠50只，体重200±20g，适宜24h，随机分为空白对照组、模型对照组、小柴胡汤高剂量组(13.9g/kg)、小柴胡汤中剂量组(6.9g/kg)、小柴胡汤低剂量组(3.5g/kg)，每组10只。除空白对照组外各组大鼠腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA剂量，350mg/kg)，每日1次，连续2日，建立失眠大鼠模型。从第3日给药，其中空白组和模型组给予纯净水，药物组分别给小柴胡汤高剂量、中剂量、小剂量，连续给药10天。实验动物末次给药后，大鼠取脑，固定，脱水，透明，包埋；制作石蜡切片；采用免疫组化方法染色镜检，并进行统计分析。

具体实验结果如下：

表1小柴胡汤对GABRA1、GABRB2受体靶标的作用

注：与模型对照组相比，*P＜0.05，**P＜0.01

通过镜检以及检测可知，各大鼠下丘脑GABRA1、GABRB2受体均有表达，其中，模型组的阳性表达少于空白对照组，而各给药组的GABRA1、GABRB2受体均高于模型对照组，且呈现剂量正相关。表明小柴胡汤对GABRA1、GABRB2受体靶标具有正调节作用。