[发明专利]海绵红球菌来源的抗病原菌活性化合物的制备及用途

说明书

本发明涉及医药技术领域，具体是一种新化合物及其制备方法和在抗菌剂中的应用。所述的化合物是由海绵共附生红球菌Rhodococcus sp.发酵产生，其化学结构如下所示，并具有强抗菌活性，为开发抑制海洋病原菌提供了新的候选化合物。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体地说，是从海绵红球菌(Rhodococcus sp.) 中分离纯化得到的新型化合物及其在制备抗菌剂中的应用。

背景技术

哈氏弧菌(Bivrio harveyi)广泛分布于海洋环境中，是海水鱼虾养殖中常见的致病菌，可感染花鲈鱼、石斑鱼、对虾等多种水产养殖动物导致大规模死亡，给海水鱼虾养殖业造成巨大的损失。目前防治弧菌感染主要有疫苗及化学药物两类手段，但弧菌疫苗存在靶向类群单一，主要保护性抗原的抗原性不强、免疫保护率低等问题。抗菌药物防治弧菌感染是最直接有效的选择，但也造成了多重耐药菌的产生，以及药物残留等问题，已渐入无药可用的窘境，因此发现新的抗弧菌药物对高效控制弧菌感染具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一个新的从海绵红球菌(Rhodococcus sp.)中分离纯化得到的化合物及其在制备抗菌剂中的应用。

本发明的第一方面，提供一种新型化合物hexanindoleacetate，其化学结构如式(I)所示：

本发明的第二方面，提供上述的化合物hexanindoleacetate的制备方法，所述的化合物是从海绵红球菌(Rhodococcus sp.)的发酵培养物中分离得到。

优选的，所述的制备方法包括以下步骤：

a、发酵，制备海绵红球菌(Rhodococcus sp.)发酵培养物，收集发酵液，发酵液用等体积的乙酸乙酯萃取3次，合并萃取物并浓缩得到乙酸乙酯萃取部位；

b、上述乙酸乙酯萃取部位经Sephadex LH-20凝胶柱色谱分离，以 CH₂Cl₂∶MeOH＝1∶1作为溶剂进行洗脱，得到组分Fr.A-Fr.E；Fr.C用减压硅胶柱色谱分离，采用石油醚-丙酮梯度洗脱，根据薄层色谱TLC分析结果合并得到组分Fr.C1-Fr.C8，Fr.C4经过反相中压和反相半制备高效液相(xBridge Prep C18，10mm×250mm，5μm)纯化分离得到化合物hexanindoleacetate (48％甲醇-水-0.1％甲酸，tR＝28min，3.1mg)。

优选的，所述步骤a的制备海绵红球菌(Rhodococcus sp.)发酵培养物的方法包括以下步骤：将活化的海绵红球菌(Rhodococcus sp.)接入种子培养基中，28℃，220rpm，摇床培养72h得种子液，将种子液以10％的接种量接到发酵培养基中，28℃，220rpm，摇床震荡培养10天，获得菌株的发酵培养物。

优选的，所述的种子培养基和发酵培养基的配方为每升培养基中含有：甘露醇20g、麦芽糖20g、CaCO₃ 15g、葡萄糖10g、谷氨酸钠10g、酵母提取物 3g、玉米浆1g、KH₂PO₄0.5g、MgSO₄·7H₂O 0.3g、海盐30g、蒸馏水1L。

本发明的第三方面，提供上述的化合物hexanindoleacetate或其药用盐，在制备抗菌剂中的用途。

本发明对所得化合物进行了体外抗菌活性评价，结构表明该类化合物具有很强的抗菌活性，其MIC₅₀值分别为1.2±0.28μM，可作为抗菌剂用于抑制海洋病原弧菌。

本发明的第四方面，提供一类抗菌剂，其包含有效量的hexanindoleacetate，或其药用盐作为活性成份。所述的药物中还可以包含药学上可以接受的载体。