[发明专利]一种铁皮石斛中石斛多糖与石斛碱的提取工艺

说明书

本发明提供了一种铁皮石斛中石斛多糖与石斛碱的提取工艺，包括以下步骤：(1)将石斛清洗、干燥、粉碎；(2)将石斛粉末进行超临界CO2萃取得到提取液A；(3)将提取液A萃取、减压浓缩、干燥，得石斛碱；(4)石斛渣水浸渍后离心分离，将上清液蒸发浓缩得到提取液B；(5)提取液B醇沉液抽滤后保留沉淀；(6)沉淀溶于蒸馏水加入蛋白酶进行酶解，酶解后加入三氯乙酸溶液静置沉淀，过滤收集滤液；(7)滤液中加入活性炭，静置过滤收集滤液，将滤液进行冷冻干燥后得到石斛多糖。本发明实现对铁皮石斛中石斛多糖与石斛碱的分步提取，石斛多糖和石斛碱提取率高，得到的石斛多糖和石斛碱纯度高。

技术领域

本发明涉及石斛加工技术领域，具体涉及一种铁皮石斛中石斛多糖与石斛碱的提取工艺。

背景技术

铁皮石斛是兰科草本植物，生于海拔达1600米的山地半阴湿的岩石上。主要分布于中国安徽、浙江、福建等地。铁皮石斛具有滋阴养胃、润肺止咳和清热明目之功效，是传统的珍稀名贵中药材之一，名列“九大仙草”之首，因具有抗肿瘤、抗衰老、抗声带疲劳、扩张血管和增强人体免疫力等作用，被称为救命仙草。

经现代药理学研究证明，铁皮石斛中含有的主要活性成分为石斛多糖、石斛碱、氨基酸、芪类及其衍生物、微量元素以及多种挥发性成分等。石斛多糖具有提高免疫力、抗肿瘤作用；可改善造血、凝血功能，对降低血糖也有一定功效；对治疗中枢神经系统、肝脏、肾脏、胃肠道病变有效；对烫伤、病毒、细菌感染也有显著疗效。石斛碱可用于预防和治疗关节炎，保护消化道粘膜急性或慢性损伤，特别用于防治急性的慢性消化道溃疡，此外还有报道石斛生物碱具有调节雌性激素分泌和促进卵泡发育、降低心率、抑菌、镇痛、改善记忆力减退等作用。

目前，石斛多糖和石斛碱可作为保健品或保健食品的添加成分，具有较高的经济价值，因此，大规模提取铁皮石斛中石斛多糖和石斛碱具有产业价值。现有石斛多糖提取方式主要有加热浸提法、酶解法、超声辅助提取法、微波辅助提取法等，石斛碱的提取方式也比较多，常规提取方法主要有浸渍法、渗漉法、回流法、微波辅助萃取、超声波提取法等方法，但是同时对石斛多糖和石斛碱提取的方法较少，石斛多糖和石斛碱提取时回相互干扰，且铁皮石斛中的蛋白质和色素也混杂在提取的石斛多糖和石斛碱中，影响产品的品质。

发明内容

本发明目的是为了弥补已有技术缺陷，提供一种铁皮石斛中石斛多糖与石斛碱的提取工艺，实现对铁皮石斛中石斛多糖与石斛碱的分步提取，石斛多糖和石斛碱提取率高，得到的石斛多糖和石斛碱纯度高。

为实现上述目的，本发明通过以下方案予以实现：

本发明提供了一种铁皮石斛中石斛多糖与石斛碱的提取工艺，包括以下步骤：

(1)将石斛洗净后置于50-60℃恒温干燥箱中干燥4-5h，然后将石斛粉碎过50-60目筛；

(2)将石斛粉末放入萃取釜中，进行超临界CO₂萃取，再将萃取后的萃取液经过分离釜分离出CO₂，得到提取液A；

(3)将提取液A用水和氯仿混合的萃取液进行萃取，充分混合后于4-6℃静置10-12h，取氯仿层，将氯仿层溶液进行减压浓缩、干燥，得石斛碱；

(4)向经过步骤(2)萃取后的石斛渣中加入20-30倍质量的蒸馏水，超声处理10-20min，水浴处理2-5h，然后置于离心机中离心分离，收集上清液，将上清液蒸发浓缩得到提取液B；

(5)向提取液B中加入3-4倍体积的无水乙醇，充分混合后于4-6℃静置沉淀8-10h，醇沉液抽滤后保留沉淀；

(6)将步骤(5)所得沉淀溶于相同质量的蒸馏水中，调节pH值，然后向溶液加入蛋白酶进行酶解处理，再向酶解处理后的溶液中加入3-4倍体积的三氯乙酸溶液，充分混合后后于4-6℃静置沉淀8-10h，过滤收集滤液；