[发明专利]修饰的免疫细胞及其应用

说明书

本发明属于细胞治疗领域，具体而言，本发明涉及通过基因修饰免疫细胞如T细胞、肿瘤浸润T细胞、NK细胞、NKT细胞和巨噬细胞，使其增强在实体肿瘤处的归巢和聚集以及实体瘤浸润，进而增强免疫细胞对于实体肿瘤的治疗效果。

技术领域

本发明属于免疫细胞治疗领域。具体而言，本发明涉及通过基因修饰的免疫细胞，使其增强在实体肿瘤内的归巢和聚集，进而增强免疫细胞例如CAR-T细胞对于实体肿瘤的治疗效果。

背景技术

近几年来，肿瘤免疫疗法发展迅速，尤其是过继性细胞疗法（ACT），即指从病人体内分离出T细胞、NK细胞等免疫细胞，通过体外修饰扩增培养，随后回输入患者体内进行肿瘤治疗的方法。2013年，肿瘤的免疫疗法被Science杂质评为“十大突破”之首。

CAR-T和TCR-T是过继性细胞疗法重要的组成部分，尤其CAR-T疗法，在血液肿瘤的治疗上取得了显著的成就，取得了较高的缓解率，典型的CAR结构由三部分组成，胞外识别肿瘤抗原的scFv、铰链和跨膜结构域、胞内共刺激信号和激活结构域。第一代的CAR并不包含胞内共刺激信号，CAR-T细胞的杀伤活性较低且生存时间较短。因此，第二代CAR开始加入共刺激信号如CD28和4-1BB，采用不同的共刺激信号的CAR-T细胞的特性也不尽相同，CD28增强了CAR-T细胞的杀伤活性而4-1BB则增强CAR-T细胞杀伤活性的同时延长了CAR-T细胞的生存时间。随后，出现了共同表达两个共刺激信号域的三代CAR，然而其抗肿瘤效果并不如二代CAR-T。因此，现在临床应用的主要为二代CAR-T细胞。

CAR-T疗法不仅在血液肿瘤的治疗上成果显著，而且商业化进展顺利，美国FDA于2017年正式批准了两种CAR-T药品上市。尽管CAR-T细胞疗法在血液肿瘤的治疗上大放异彩，而对于实体瘤却并没有较好的治疗效果，缓解率低且容易发生脱靶等毒副作用。CAR-T细胞不能有效的在实体瘤处聚集是影响其疗效的重要因素之一，虽然已有研究采用局部输注CAR-T细胞的方式以增强其在肿瘤细胞的数目进而增强其抗肿瘤活性，然而这种输注方式使用范围较小。因此，仍然需要新的方式诱导CAR-T细胞在实体肿瘤内的归巢聚集。科研人员对CAR-T细胞实体瘤治疗作了大量研究，采用多种方式对CAR-T细胞进行了改良，例如专利CN110157682A, 人工靶向修饰的CAR-T细胞及其制备方法与应用, 涉及代谢修饰的CAR-T细胞及其制备方法与应用，其通过在CAR-T细胞表面标记偶联有叠氮等的糖类、氨基酸等生物活性分子，使得生物活性分子在活体内可以有效地将CAR-T细胞靶向引导至肿瘤部位；而体内这种靶向与拉近使得CAR-T细胞上特异性CAR分子在肿瘤部位与肿瘤抗原结合，从而刺激CAR-T细胞特异性活化，达到更为高效的肿瘤杀伤能力。专利CN110144325A，一种靶向性T淋巴细胞及其制备方法和应用，提供了一种靶向性T淋巴细胞，包括靶向DR5的嵌合抗原受体CARDR5和/或靶向c Met的嵌合抗原受体CAR c Met，CAR DR5可以专一性的靶向DR5，CAR c Met可以专一性的靶向c Met，从而促进T细胞在患者体内的扩增，高效且特异性的杀伤肿瘤细胞，并且能够有效的抑制肿瘤细胞逃逸的发生，更好的维持细胞的活力和杀伤力。