[发明专利]一种检测DNA片段含量的多通道检测方法

说明书

本发明公开了一种检测DNA片段含量的多通道检测方法，根据金纳米棒、磁珠和待测样品可形成稳定结构的特性，通过计算金纳米棒的比例关系确定待测杨样品中DNA的比例关系。本发明第一次将高光谱解码技术应用于金纳米棒的消光光谱的分解中，提出了基于高光谱解码技术解码金纳米棒消光光谱实现生物分子检测的方法，提高了金纳米棒作为编码材料应用于实际检测中的利用效率，实现了生物分子的多通道分析，有利于稀少样本的检测。

技术领域

本发明涉及免疫学检测方法，尤其涉及一种新的生物分子含量检测试剂及方法。

背景技术

随着生命科学的发展，生物分子的检测和分析已成为生物医学领域不可或缺的一部分。通过定量和定性检测，可以实现生物分子的鉴定，从而完成疾病的预防和诊断。在实际应用中，通常需要同时检测和分析多种生物分子，这意味着多通道分析技术在实际检测中很重要。而近年来，许多研究人员不断努力为生物分子的检测和分析创造新的方法和技术，而新的检测和分析技术中金纳米粒子的应用就是其中重要的例子之一。

金纳米棒(AuNRs)是一种从几纳米到几百纳米的棒状金纳米粒子，具有相对稳定但非常丰富的化学和物理性质，局部表面等离子体共振(LSPR)作为其独特的光学特性，在特定波长的光下产生共振后可以使金属纳米颗粒在紫外-可见(UV-vis)光带中表现出强烈的光谱吸收。一般，金纳米棒在紫外-可见消光光谱中有两个峰：横向LSPR峰和纵向LSPR峰，随着金纳米棒长径比的不断变化，横向LSPR峰值位置基本保持不变，但纵向LSPR峰值位置则发生相应的变化。理论上，不同长径比的金纳米棒具有不同的纵向LSPR峰，若利用这一特点，可以将金纳米棒用作编码材料来检测生物分子。但是考虑到金纳米棒的半高宽比较宽，当不同长径比的金纳米棒作为编码材料混合时会发生光谱重叠，这限制了编码消光光谱在实际检测中的利用效率。

高光谱技术，起源于遥感领域，可以提供连续的光谱特征，已经应用于许多领域，其中高光谱解混是高光谱技术研究的重要一步，而在高光谱解码算法中，会假设不同的端元之间不会相互干扰，这与不同长径比的金纳米棒的消光光谱混合时互不影响特点一致。混合光谱是由不同的基本光谱线性组合得到，利用高光谱解混算法，可以实现分解混合光谱的目的。若考虑将高光谱解码算法与金纳米棒的LSPR特性组合，有望实现生物分子的多通道检测。

现有技术中，由于金纳米棒消光光谱的光谱较宽，利用金纳米棒的消光光谱作为编码元素实现生物分子检测的方法很少。高光谱解码算法并未应用于金纳米棒消光光谱的解码，高光谱解码算法结合目标生物分子、金纳米棒和磁珠形成的“三明治”结构用于生物分子检测也未得到过相应的报道与应用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测DNA片段含量的多通道检测方法。

本发明所采取的技术方案是：

本发明的第一个方面，提供：

一种用于检测DNA片段含量多通道检测方法的检测试剂，包括：偶联有单链核苷酸序列A的磁珠，其中，核苷酸序列A可与目标单链DNA一端的序列互补配对；偶联有单链核苷酸序列B的金纳米棒，其中，核苷酸序列B可与目标单链DNA另一端的序列互补配对。

偶联有单链核苷酸序列A的磁珠和偶联有单链核苷酸序列B的金纳米棒可以与目标单链结合成稳定结构。

当然，也可以根据实际的需要，选择其他具有特异性吸附能力的材料替代磁珠，以达到固定待测样品的作用。

在一些实例中，上述金纳米棒包括至少两种不同长径比的金纳米棒。

在一些实例中，上述不同长径比的金纳米棒上偶联有针对不同目标单链DNA的单链核苷酸序列。其目的在于区分不同目标单链DNA。

本发明的第二个方面，提供：

一种检测DNA片段含量的多通道检测方法，具体步骤为：