[发明专利]一种钙依赖型耐热α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶的编码基因、制备技术和应用

权利要求书

1.一种来源于微细正青霉（Eupenicillium parvum）的钙依赖型耐热α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶EpABF62C，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.权利要求1所述的钙依赖型耐热α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶EpABF62C的编码基因，其碱基序列如SEQ ID NO.2所示。

3.含有权利要求2所述的钙依赖型耐热α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶EpABF62C的编码基因的表达载体M13-EpABF62C。

4.一种钙依赖型耐热阿拉伯呋喃糖苷酶EpABF62C的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）以权利要求3所述表达载体M13-EpABF62C以原生质体法转化瑞氏木霉（Trichodermareesei），获得重组菌株；

2）用含1%乳糖作碳源的Mandels培养基对重组菌株进行诱导培养；

3）用镍柱系统纯化所表达的钙依赖型耐热阿拉伯呋喃糖苷酶EpABF62C。

5.权利要求1所述的耐热阿拉伯呋喃糖苷酶EpABF62C在制备单糖和低聚糖中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，

1）以权利要求4所述制备方法制备得到的钙依赖型耐热α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶EpABF62C经过CaCl2溶液饱和处理；

2）钙依赖型耐热阿拉伯呋喃糖苷酶EpABF62C与内切型木聚糖酶协同作用酶解小麦阿拉伯木聚糖，制备阿拉伯糖、木糖和低聚糖；

3）钙依赖型耐热阿拉伯呋喃糖苷酶EpABF62C与内切型木聚糖酶协同作用降解去淀粉小麦麸皮制备还原糖。

7.用于扩增权利要求2所述的钙依赖型耐热α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶EpABF62C的编码基因的特异性引物对，其特征在于，包括以下两条序列：

上游引物：5′-ttggccacagctcgtgctcagtcggactgcgcacttccgtcga-3′；

下游引物：5′-ctttcgcacggagctctcgagtcagtgatggtgatggtgatgattcttcagggtaagca-3′。