[发明专利]一种黄曲霉毒素降解菌的高效发酵方法有效

专利信息
申请号: 202010038988.6 申请日: 2020-01-14
公开(公告)号: CN111154679B 公开(公告)日: 2021-08-06
发明(设计)人: 周文文;韦显雪;王树雯;钱超 申请(专利权)人: 浙江大学
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;A23L5/20;C12R1/07
代理公司: 杭州求是专利事务所有限公司 33200 代理人: 郑海峰
地址: 310058 浙江*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 黄曲霉 毒素 降解 高效 发酵 方法
【权利要求书】:

1.一种黄曲霉毒素降解菌的高效发酵方法,其特征在于:在黄曲霉毒素降解菌的发酵体系中添加合适的携氧剂,步骤如下:

(1)种子液制备:将待用的黄曲霉毒素降解菌接种到LB培养基中培养得到种子液;所述的黄曲霉毒素降解菌为阿耶波多氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)DT,保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏编号为CGMCC No.14949,保藏日期为2017年11月22日;

(2)发酵培养:将步骤(1)所述种子液接种到LB培养基中;

(3)添加携氧剂:在发酵培养4-10h后加入相对于发酵液体积百分比为0.5%-1.5%的十二烷;

(4)发酵培养15-25h认为发酵完毕。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于:在所述步骤(1)中,培养条件为37℃、摇床转速180rpm,培养时间为10-14h。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于:在所述步骤(2)中,将所述种子液以体积百分比2%-10%的比例接种到LB培养基中,培养温度为37℃,摇床转速220-240rpm。

4.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的黄曲霉毒素降解菌保存于质量分数25%的甘油中并存放在-80℃冰箱中;在所述的步骤(1)使用前,还包括前置活化步骤;

所述的前置活化步骤具体为:先将菌种接种在LB琼脂培养基上进行菌种活化,在37℃培养箱培养12-24h,待有菌落形成挑取适量单菌落接种到新的LB琼脂培养基上,在37℃培养箱培养12-24h获得待用的黄曲霉毒素降解菌。

5.如权利要求1-4任一项所述的方法,其特征在于:所述LB培养基为:氯化钠10.0g/L、酵母浸粉5.0g/L、胰蛋白胨10.0g/L,水为蒸馏水,121℃高压灭菌20min;所述LB琼脂培养基为:氯化钠10.0g/L、酵母浸粉5.0g/L、胰蛋白胨10.0g/L、琼脂条15~20g/L,水为蒸馏水,121℃高压灭菌20min。

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