[发明专利]用于检测弓形虫的重组蛋白及其编码基因

说明书

本发明实施例公开了一种蛋白质，是如下a)或b)的蛋白质：a)由SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)由SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基取代和/或缺失和/或添加且与弓形虫的抗血清特异结合的蛋白。本发明实施例对弓形虫MIC2、MIC3、SAG1的基因进行抗原性分析，截取高抗原性区域，根据大肠杆菌密码子偏嗜性进行密码子优化，并加入连接链Linker(其氨基酸序列为GGGGSGGGGSGGGGS)进行串联，构建重组表达载体以及重组表达菌，获得弓形虫MIC2‑MIC3‑SAG1重组表达蛋白，同时克服了表达蛋白产量低的缺陷。

技术领域

本发明实施例涉及生物技术领域，具体涉及一种用于检测弓形虫的重组蛋白及其编码基因。

背景技术

弓形虫病(Toxoplasmosis)是由弓形虫(Toxoplasma gondii)感染引起的一种可导致人及动物流产、畸形或死胎等的人兽共患寄生虫病，呈世界范围流行，严重危害公共卫生安全和畜牧业生产。孕妇、肿瘤患者、艾滋病患者等感染尤为严重，孕妇感染弓形虫病后可以导致流产、死胎和胎儿畸形，甚至导致胎儿发育迟缓以及弱智。此外器官移植患者以及艾滋病人等免疫力缺陷患者感染弓形虫可以导致死亡。

犬猫在弓形虫的生活史中扮演了重要角色，猫作为弓形虫的终末宿主，可将弓形虫卵囊随粪便排出，污染环境，犬摄入卵囊污染的水或食物，再排出未活化卵囊，起到搬运工的作用。随着我国经济迅猛发展和人们生活水平的提高，城市中宠物犬、猫饲养量逐渐上升，人亲密接触宠物犬、猫增加了弓形虫传播给人的几率。另外，动物接触弓形虫卵囊污染的环境后后发生感染，当人通过摄入含有弓形虫包囊的未煮熟的动物肉类或食用被弓形虫卵囊污染的水果、蔬菜、饮用水而感染。弓形虫病的快速诊断将是弓形虫病防控工作的重点，犬、猫弓形虫的感染检测显得尤为重要。

目前对于检测犬、猫弓形虫病的确诊很困难，临床常用的血清学检测方法有间接荧光抗体试验(IFA)、间接血凝试验(IHA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)等。虽然IFA及MAT可以作为弓形虫抗体检测标准，但是存在检测实验室仪器设备要求过高，检测费时、费力、成本过高等问题，不能在各个实验室推广使用。酶联免疫吸附试验(Enzyme linkedimmunosorbent assay,ELISA)是目前诊断弓形虫病常用的特异性强、灵敏度高的血清学检测方法，其操作方便快捷、检样品量大、实验条件要求低、易于标准化等特点，而成为临床及实验室广泛使用的检测方法。

目前，国内外常用的弓形虫病免疫诊断抗原包括：速殖子粗抗原、速殖子纯化抗原、基因重组抗原三种。近年来弓形虫ELISA检测所用的抗原多是虫体可溶性抗原，需要培养具有感染性的速殖子，具有较大的生物安全隐患，且容易与其他寄生虫发生较高的交叉反应。另外，其成分不确定，抗原制备批次间差别较大，不易标准化。

综上所述，如何制备更加敏感、特异的弓形虫诊断抗原，建立特异性强、灵敏度高的动物弓形虫病血清学检测方法，是亟待解决的技术问题。

发明内容

为此，本发明实施例提供一种用于检测弓形虫的重组蛋白及其编码基因，以解决现有技术中检测弓形虫的特异性差、灵敏度低的问题。

为了实现上述目的，本发明实施例提供如下技术方案：

本发明实施例提供一种蛋白质，是如下a)或b)的蛋白质：

a)由SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

b)由SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基取代和/或缺失和/或添加且与弓形虫的抗血清特异结合的蛋白。

编码所述蛋白质的基因也属于本发明实施例的保护范围。

编码所述蛋白质的基因为如下1)或2)或3)的基因；

1)其核苷酸序列是如SEQ ID NO:1所示的DNA分子；