[发明专利]利用高效液相色谱法测定驱虫药有效成分含量的方法

权利要求书

1.一种利用高效液相色谱法测定驱虫药有效成分含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)供试品溶液的制备

取供试品，制成供试品溶液；

2)对照品溶液的制备

取阿苯达唑、阿维菌素、伊维菌素、氯舒隆、吡喹酮、双羟萘酸嘧啶、氯羟柳胺、氯硝柳胺精密称定，加甲醇溶解、稀释并定容；

3)色谱条件

色谱柱填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；

流动相及洗脱方式：以缓冲溶液0.1mol/L醋酸钠溶液为流动相A，以甲醇为流动相B，以乙腈为流动相C，按以下程序进行梯度洗脱：

0-6min：流动相为体积比60:40的流动相A-流动相C混合液；

6-8min：流动相由体积比60:40的流动相A-流动相C混合液线性变化为体积比5:9:86的流动相A-流动相B-流动相C混合液；

8-20min：流动相由体积比5:9:86的流动相A-流动相B-流动相C混合液；

20-22min：流动相由体积比5:9:86的流动相A-流动相B-流动相C混合液线性变为体积比60:40的流动相A-流动相C混合液；

22-25min：流动相为体积比60:40的流动相A-流动相C混合液；

检测波长：按以下程序采用变化波长：

0-6min：检测波长为210nm；

6-10min：检测波长为295nm；

10-15min：检测波长为210nm；

15-25min：检测波长为243nm；

柱温：35℃；

流速：1ml/min；

进样量：20ul；

4)测定

精密量取供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密量取对照品溶液注入液相色谱仪，同法测定；按外标法以峰面积分别计算供试品中各有效成分的含量。

2.根据权利要求1所述一种利用高效液相色谱法测定驱虫药有效成分含量的方法，其特征在于，步骤4)所述各有效成分的含量计算公式如下式所示：

式中：

X：以标示量表示的相对百分含量(％)；

A_R：对照品的峰面积；

m_R：对照品的称取量(mg)；

A_X：供试品的峰面积；

m_X：供试品的取量(mg)；

C：干燥对照品含量(％)。

3.根据权利要求1所述一种利用高效液相色谱法测定驱虫药有效成分含量的方法，其特征在于，步骤1)所述供试品溶液的制备方法包括以下步骤：

供试品为固体样品：取供试品，研细，精密称定，置100ml棕色量瓶中，加入甲醇超声15min，加入甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，所得滤液作为供试品溶液；

或，供试品为非水溶剂注射液：精密量取供试品，置100ml棕色量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；

或，供试品为除含水注射液外的其它液体样品：精密量取供试品，置100ml棕色量瓶中，加入甲醇溶解稀释至刻度，摇匀，滤过，所得滤液作为供试品溶液。

4.根据权利要求1所述一种利用高效液相色谱法测定驱虫药有效成分含量的方法，其特征在于，步骤2)所述对照品溶液的制备方法包括以下步骤：

精密称取阿苯达唑25mg、阿维菌素10mg、伊维菌素10mg、氯舒隆10mg、吡喹酮10mg、双羟萘酸嘧啶50mg、氯羟柳胺25mg、氯硝柳胺25mg，置100ml棕色量瓶中，加甲醇10ml超声使溶解，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。