[发明专利]一种构象锁定蜂毒肽Anoplin衍生物的制备方法与抗肿瘤应用

说明书

本发明涉及一类构象锁定蜂毒肽Anoplin衍生物，其特征在于，肽链上含有式(I)所示的片段，所述片段位于Anoplin肽链的端部或中间段，各x来源于蜂毒肽Anoplin中的序列，通过在Anoplin肽段侧链形成碳氢支架以稳定多肽的α‑螺旋构象，达到构象锁定的目的。体内外的药理实验均表明，本发明的化合物对黑色素瘤细胞B16F10显示出很强的抑制活性，且具有高效、稳定等优点，在制备抗黑色素瘤药物方面具有重大潜力。

技术领域

本发明涉及药物化合物技术领域，具体地说，是关于一种构象锁定蜂毒肽Anoplin衍生物的制备方法与抗肿瘤应用。

背景技术

黑色素瘤是一种恶性程度极高的实体肿瘤，它具有高侵袭性、高转移和预后差的特点，主要涉及皮肤，是由遗传性基因变异和所处环境的风险导致的，最重要的外源性致病因素是暴露在紫外线的照射中。在全球范围，每年新诊断的原发性恶性肿瘤(不包括非黑色素瘤皮肤癌)中有232100例(占比1.7％)是皮肤黑色素瘤，并导致每年有55500例患者死亡(占所有癌症死亡的0.7％)。黑色素瘤一旦扩散，将直接关乎生命安危。近年来，随着免疫和靶向治疗研究的进展，患者预后得到了极大的改善，但是对于不适合靶向和免疫治疗的，或者这两种治疗都失败的晚期患者来说，化疗成了他们最后的治疗手段，而传统化疗药物存在毒性大和耐药的问题，因此发展高效、低毒、持久的新型抗黑色素瘤药物具有重要的意义。

Anoplin是从黄蜂Anoplius samariensis的毒液旋中提取分离得到的一条具有两亲性、α-螺旋构象的超短多肽，其氨基酸序列为：Gly-Leu-Leu-Lys-Arg-Ile-Lys-Thr-Leu-Leu-NH₂，化学结构如下所示：

近年来研究表明，Anoplin具有极其广泛的药理活性，包括抗细菌、抗真菌、抗疟疾以及抗肿瘤等。由于其良好的药理活性，极其简单的结构，且无溶血活性，使得众多学者试图通过结构修饰来研究Anoplin的构效关系和作用机制，继而开发新药来应对恶性肿瘤和多药耐药细菌感染等人类重大疾病。但是，研究也发现Anoplin存在一些缺点限制了它的临床应用，例如活性仍待提高和不耐蛋白酶水解等。

订书肽(Stapled peptides)是近年来获得广泛关注的一类稳定性强、透膜性好的多肽模拟物，在天然多肽的修饰以及很多胞内蛋白-蛋白相互作用的调控方面都展示了很好的潜力。其中，Verdine等发展的含有α-甲基非天然氨基酸的订书肽策略能够有效地提高多肽的螺旋性、稳定性和细胞通透性，从而成功实现多肽对体外及体内靶标的有效作用。

因此，通过订书肽的策略将Anoplin进行构象锁定，增加其α-螺旋程度和耐蛋白酶稳定性，同时考察其体内外对抗黑色素瘤活性的提高。目前还未见类似的报道。

发明内容

本发明的目的在于针对Anoplin现有的缺点，提供一类构象锁定Anoplin衍生物。

本发明的再一的目的是，提供一类构象锁定Anoplin衍生物的制备方法。

本发明的另一的目的是，提供一类构象锁定Anoplin衍生物的抗肿瘤用途。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：

一类构象锁定Anoplin的衍生物，所述的构象锁定Anoplin的衍生物结构通式如下：

其中，n为0～5的整数，m为0～5的整数，各x来源于蜂毒肽Anoplin中连续的氨基酸

为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：

一类构象锁定Anoplin衍生物的制备方法，该方法包括下列步骤：