[发明专利]一种液态益生菌剂保质期预测模型的建立及应用方法

说明书

本发明的目的在提供一种用于预测活菌类液态益生菌剂有效期的模型，及其建立方法和应用，所建立的模型可以依据活菌类液态益生菌产品出厂时益生菌浓度，产品在运输、贮藏以及货架期上的实时温度变化情况，预测出产品中益生菌的活菌数目，然后依据活菌类益生菌产品在其保质期内活菌数目不得少于6.0log CFU/mL的标准，实时预测出活菌类液态益生菌产品的保质期。本发明提供的方法适用于任何液态活菌类益生菌产品，为液态益生菌剂产品有效期评估提供快速简便的技术方法。

技术领域

本发明属于液态益生菌剂及及冷链物流监控技术领域，具体涉及种液态益生菌剂保质期预测模型及其应用，即一种预测在波动温度下运输贮藏的液态益生菌有效期的方法。

技术背景

人体的肠道中存在大量的乳酸菌，它是人体内必不可少的且具有重要生理功能的菌群，乳酸菌可以改变肠道内环境，抑制有害菌繁殖，调整胃肠道菌群平衡，改善肠道功能，在很大程度上缓解或治疗肠道疾病，并能提高人体免疫力，并且乳酸菌还具有抗肿瘤、抗衰老、降血脂、降血糖、降血压的功效。

目前市场上益生菌产品分为液体剂型和固体剂型，液体剂型由于含有丰富的代谢产物，所以能够快速调理胃肠道微环境，作用效果快。液体口服液还有服用方便等优点，所以占有一定的市场份额。

液体菌剂最大的问题是如何保存较高的活菌量，活菌口服液中活菌的数量对其功能性的发挥非常重要，只有达到一定活菌量的益生菌才能够在人体能发挥其益生作用。在益生菌类保健食品申报与审评(国食药监注[2005]202号文件)中规定活菌类益生菌保健食品在其保质期内活菌数目不得少于10⁶cfu/mL(g)，所以提高益生菌的稳定性对于益生菌产品保质期和功效来说非常重要。

有关液体菌剂的菌体数量和保质期，都是按照传统的微生物学检测方法来检测，需要对不同储藏和运输条件下的液体菌剂进行抽样检查，不但费时费力，并且结果需要在48小时之后或更长才能得知，严重滞后。而预测模型可以根据液体制剂中微生物在不同条件下的死亡率规律，对其数量变化趋势进行模拟运算，从而达到实时预测液体菌剂菌量变化和保质期的目的。

目前预测微生物学主要用在食品领域预测病原微生物的生长和死亡，定量地评估该食品安全程度，给食品货架期提供数据支持。很多微生物预测模型都是针对食品中病原菌生长的，而在液体菌剂领域，预测微生物学模型几乎没有应用。

发明内容

本发明的目的在提供一种用于预测活菌类液态益生菌剂有效期的模型，及其建立方法和应用，所建立的模型可以依据活菌类液态益生菌产品出厂时益生菌浓度，产品在运输、贮藏以及货架期上的实时温度变化情况，预测出产品中益生菌的活菌数目，然后依据活菌类益生菌产品在其保质期内活菌数目不得少于6.0log CFU/mL的标准，实时预测出活菌类液态益生菌产品的保质期。本发明提供的方法适用于任何液态活菌类益生菌产品，为液态益生菌剂产品有效期评估提供快速简便的技术方法。

本发明首先提供了一种液态益生菌剂有效期预测模型的建立方法，包括如下步骤：

1)将液态益生菌剂产品置于不同温度下恒温贮藏，采用标准的取样法和微生物检测法，分别定时取样测定液态益生菌剂产品中活菌的数量；

2)将在步骤1)中测得的液态益生菌剂产品在不同恒温贮藏条件下的活菌浓度数据采用公式A进行Fermi一级模型的拟合，求得液态益生菌剂产品在该条件下的液体益生菌剂灭活速率k_D和益生菌菌剂数量稳定期t_L；

其中，t为时间d，N_t为在t时间的活菌数，N₀为初始的活菌数，S(t)为N_t与N₀的比值；k_D为液体益生菌剂灭活速率，t_L为益生菌菌剂数量稳定期，e为自然常数；