[发明专利]基于CoOOH-TMB氧化系统的比色方法用于检测谷胱甘肽

权利要求书

1.一种检测GSH的方法，其特征是，该方法包括以下步骤：

制备标准曲线以及线性方程；

将待测样品与羟基氧化钴纳米片溶液混合后进行孵育，获得混合溶液一；所述羟基氧化钴纳米片溶液为羟基氧化钴纳米片和聚乙二醇组成的混合溶液；所述羟基氧化钴纳米片溶液的浓度为50～150μg/mL，所述孵育温度为40℃，孵育时间为3～5h；

向混合溶液一中加入醋酸-醋酸盐缓冲溶液和四甲基联苯胺溶液，混合均匀，获得混合溶液二；所述醋酸-醋酸盐缓冲溶液的pH为3～4；所述四甲基联苯胺 溶液的浓度为2～8mmoL/L；

测定混合溶液二的吸光度，将混合溶液二的吸光度数据代入线性方程，即可测定GSH的含量。

2.如权利要求1所述的方法，其特征是，所述待测样品是生物样品或非生物样品。

3.如权利要求2所述的方法，其特征是，所述样品是细胞、全血、血浆或血清。

4.如权利要求1所述的方法，其特征是，所述羟基氧化钴纳米片的形貌为规则的或不规则的六边形，六边形的边长为50～150nm。

5.如权利要求4所述的方法，其特征是，羟基氧化钴纳米片的制备方法，该方法包括以下步骤：

向Co(NO₃)₂·6H₂O溶液中加入NaOH溶液，将混合物超声分散，然后将NaClO溶液加入到上述超声处理过的混合物中再进行超声处理，获得羟基氧化钴纳米片；

其中，所述Co(NO₃)₂·6H₂O溶液的浓度为5～15mmoL/L，NaOH溶液的浓度为0.5～1.5moL/L，NaClO溶液的浓度为0.5～1.5moL/L，加入的Co(NO₃)₂·6H₂O溶液、NaOH溶液和NaClO溶液的体积比例为400～800:100～150:10～50。

6.如权利要求1所述的方法，其特征是，孵育时间为4h。

7.如权利要求1所述的方法，其特征是，待测样品、羟基氧化钴纳米片溶液和TMB溶液的体积比例为(300～500)：(300～500)：(50～150)。

8.一种检测GSSG的方法，其特征是，该方法包括以下步骤：

向待测样品中加入GSH掩蔽剂，混合均匀，得到混合溶液三；

向混合溶液三中加入GSSG碱性还原剂，混合均匀，得到混合溶液四；

向混合溶液四中加入所述GSSG碱性还原剂的中和试剂，混合均匀，得到混合溶液五；

按照权利要求1～7中任一项所述的检测GSH的方法进行操作，即可检测GSSG的含量。

9.如权利要求8所述的方法，其特征是：所述检测GSSG的方法，还包括制备标准曲线以及线性方程的步骤。

10.一种测定GSH和GSSG比值的方法，其特征是，该方法包括以下步骤：

根据权利要求1～7中任一项所述的检测GSH的方法测定待测样品中的GSH的含量；

根据权利要求8或9所述的检测GSSG的方法测定待测样品中的GSSG的含量；

计算GSH和GSSG的比值。