[发明专利]一种重组枯草芽孢杆菌细胞在酶法生物降解N-甲基有机氮农药中的应用

权利要求书

1.一种重组Bacillus subtilis WB600细胞在酶法生物降解N-甲基有机氮农药中的应用，其特征在于，所述重组Bacillus subtilis WB600细胞为转化带有pMA5-trsox基因质粒或pMA5-YwbN-trsox基因质粒的重组细胞；

当基因质粒为pMA5-trsox时，所述重组Bacillus subtilis WB600细胞制备方法如下：将Thermomicrobium roseum肌氨酸氧化酶基因构建于pMA5-trsox质粒，并转化Bacillussubtilis WB600细胞中，并进行胞内表达，得到重组Bacillus subtilis WB600细胞；其中，所述pMA5-trsox质粒的基因序列如SEQ ID NO.1所示；所述重组Bacillus subtilis WB600细胞在酶法生物降解N-甲基有机氮农药的具体方法步骤如下：将所得重组Bacillussubtilis WB600细胞进行发酵培养，并与N-甲基有机氮农药溶液混合，进行生物降解；

当基因质粒为pMA5-YwbN-trsox时，所述重组Bacillus subtilis WB600细胞制备方法如下：将Thermomicrobium roseum肌氨酸氧化酶基因构建于MA5-YwbN-trsox质粒，并转化Bacillus subtilis WB600细胞中，并进行内分泌表达，得到重组Bacillus subtilisWB600细胞；其中，所述pMA5-YwbN-trsox质粒的基因序列如SEQ ID NO.2所示；所述重组Bacillus subtilis WB600细胞的酶法生物降解N-甲基有机氮农药的具体方法步骤如下：将所得重组Bacillus subtilis WB600细胞进行发酵培养，得到培养液上清，并将所得培养液上清与N-甲基有机氮农药溶液混合，进行生物降解。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述重组Bacillus subtilis WB600细胞发酵的方法为：使用TB培养基，在30-50℃下，发酵36-72h。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述生物降解的反应条件为：pH值为6-8，温度为30-50℃，时间为3-5h。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述重组Bacillus subtilis WB600细胞或培养液上清与N-甲基有机氮农药溶液的体积用量比为1：1-1：50。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述N-甲基有机氮农药为西维因、速灭威、涕灭威、害扑威、残杀威、涕灭威、灭多威、异丙威、混杀威、牙根灵中一种或多种。