[发明专利]一种柿子低聚原花青素的制备方法及其应用

说明书

本发明公开了一种柿子低聚原花青素(P‑OPC)的制备方法及其应用。所述柿子低聚原花青素是在氢气存在的条件下，柿子原花青素在高温和Pb/C催化剂的催化作用下降解所得到的产物。细胞实验和动物实验都表明了柿子低聚原花青素可以显著降低UV‑B辐照诱导的细胞和皮肤损伤水平。因此，本发明中的柿子低聚原花青素可以作为具有紫外损伤修复作用的添加剂用于食品、药品、化妆品等领域。

技术领域

本发明涉及植物功能性成分的降解技术领域，特别是涉及一种柿子低聚原花青素的制备方法及其应用。

背景技术

太阳光中的紫外线(UV)可分为波长320－400nm的长波紫外线(UV-A)；波长为290－320nm的中波紫外线(UV-B)；及波长为180－290nm的短波紫外线(UV-C)。UV-A作用于皮肤深层，可穿透真皮，使皮肤一次性变黑；UV-B作用于皮肤表层，晒伤会导致皮肤变红，如经常被晒伤，则会大大增加皮肤癌发生的概率；UV-C绝大部分被大气臭氧层所吸收，因此对人体健康基本无威胁。

紫外线导致皮肤损伤主要机制是皮肤氧化应激、弹性相关物质降解、细胞炎症和细胞凋亡的发生。小鼠经UV-B照射后，皮肤受到刺激产生活性氧簇(ROS)。ROS作用于皮脂腺，使小鼠皮肤出现红斑。基质金属蛋白酶(MMP)-1，-3和-9的表达增加，胶原和弹性蛋白发生降解，引起皮肤下垂和皮肤皱纹。同时，UV照射增加使透明质酸酶和弹性蛋白酶发生作用，导致透明质酸和弹性蛋白降解，最终使皮肤弹性变性，引起皮肤光老化。此外，紫外线照射还会诱导HaCaT细胞中环氧化酶2(COX-2)的表达，进而引发HaCaT细胞毒性及炎症损伤。最后，UV-B照射后可明显增加HaCaT细胞中的PCNA和p53的mRNA及蛋白表达水平。并且，UV-B会使HaCaT细胞内产生过量的H₂O₂,大量的H₂O₂被分解产生·OH，进一步引起DNA的断裂，激活控制细胞凋亡的蛋白酶Caspase-3和-9。同时，嘧啶二聚体的产生引起核苷酸氧化，进一步促使细胞发生凋亡。

近年来，随着大气臭氧层不断被破坏，人们所接触的紫外线的强度越来越大，使得患皮肤癌的人数不断增加。防止UV-B损伤和紫外损伤修复成为人们目前十分关注且亟待解决的问题。紫外损伤修复主要从以上几个机制出发。制作具有抗氧化、抗炎和抑制细胞凋亡功效的食品、药品、化妆品来达到紫外损伤修复的目的。天然植物提取物一般毒副作用小、安全性高，具有一定研究优势。常见的具有紫外损伤修复功效的天然产物有黄酮类化合物、萜类、鞣质类、维生素类、香豆素类和多肽类等。

柿(Diospyros kaki Linn)，柿树科，柿属植物，原产于我国长江流域，具有很高的食用价值和医疗保健价值。近十年来，柿子的产量逐年增加，但柿子不耐贮藏且其深加工技术严重滞后，这些现象严重制约了我国柿子产业的发展。令人高兴的是，柿子中的副产物具有极高的经济附加值。例如：柿单宁。例如抗氧化，减肥等。

柿单宁属于原花青素的一种，原花青素(Proanthocyanidin)是由黄烷-3-醇单体聚合而成不同聚合度的黄酮类物质。按聚合度不同可以分为高聚原花青素、低聚原花青素和单体原花青素。目前已经证实柿单宁具有多种健康功效，柿子原花青素具有抗氧化、减肥、抗癌、抗病毒、解蛇毒和降血压等多种生理活性。然而柿单宁属于高聚原花青素，较难溶于水，并且会与食物中其他大分子如多糖和蛋白质发生强烈的相互作用，进而限制了柿单宁的利用。但是低聚原花青素能有效地解决上述部分问题。