[发明专利]一种芽孢杆菌和木霉菌联合培养方法及应用

说明书

本发明公开了一种芽孢杆菌和木霉菌联合培养的方法，包括以下步骤：将木霉菌先进行培养后,在预设间隔时间接入芽孢杆菌,进行混合发酵培养,得到微生物共生培养菌剂。还公开了该方法制备的微生物共生培养菌剂，以及该微生物共生培养菌剂在制备防治植物病害的制剂、防治植物病害中的应用，可用于防治植物立枯病，茄果类青枯病，植物土传病害，植物叶部病害。本发明改变了传统的纯培养单一菌种的发酵工艺，缓解了单一菌种发酵所带来的能源消耗高、生产效率低的问题，并且制备的微生物共生培养菌剂缓解目前单一菌剂的生物防治和促进植物生长效果差的问题。

技术领域

本发明涉及微生物共生培养技术领域，特别是涉及一种芽孢杆菌和木霉菌联合培养方法及应用。

背景技术

随着化学药剂的长期大量使用，病原菌的抗药性日渐突显，给环境安全和人类健康带来严重危害。因此，寻求环境友好、安全有效的病害防治方法受到广泛的关注。而利用微生物及其代谢产物控制病原菌来防治植物病害日益受到人们的关注和重视。目前国内使用的生物制剂微生物菌株单一，针对性不强，持效性和广谱性不理想。大量的研究表明，不同菌株之间可以存在良好的互惠共生关系，这种有益的共生关系可显著提高混合系统中各菌株的生长速率及代谢效率，从而在一定程度上提高某些产物的产量。

侧孢短芽孢杆菌在自然界中分布较广，在土壤、火山泥流、淡水、海水、昆虫体内、叶表、槐豆、堆肥、牛奶、奶酪、蜂蜜、淀粉类食物、胶制品工厂废水、动物皮毛和鹌鹑等材料中均已分离到。侧孢短芽孢杆菌是既能抗菌杀虫又有医用价值的微生物资源。侧孢短芽孢杆菌具有多种生物活性，且表现出广谱抗菌活性，尤其是对细菌和真菌。近期的全基因组测序结果表明，侧孢短芽孢杆菌还具有产生聚酮化合物、非核糖体肽和毒素等物质的潜力。它还能够产生氨基肽酶抑制剂、戊二酰基7-ACA酰基转移酶、凝血酶抑制剂、赖氨酸等活性物质，显示了良好的应用前景。侧孢短芽孢杆菌的抗菌性能与其产生的抗菌肽有关。针对侧孢短芽孢杆菌在杀虫活性上，国外研究较多，已有生物杀虫剂成品上市。多种侧孢短芽孢杆菌对不同的无脊椎动物如昆虫、线虫和软体动物都具有致病性。

其杀虫活性主要是由于伴孢体中所含蛋白质对多种昆虫具有毒性作用，接触或入侵靶标后，在细胞生长周期不同阶段产生不同物质，从而起到毒性作用。侧孢短芽孢杆菌菌株的芽孢中含有杀线虫化合物，能够抑制线虫的卵孵化和幼虫发育，因此，侧孢短芽孢杆菌已成为寄生性线虫的生物防治药剂。侧孢短芽孢杆菌还具有解磷、解钾等功能。研究表明它适合开发应用于农作物的菌肥，且能在一定程度上提高土壤中有效磷的含量和农作物的产量。研究发现侧孢短芽孢杆菌能够降解水胺硫磷、降解氧化乐果、水胺硫磷等有机磷农药的作用。人们也发现越来越多的物质能被侧孢短芽孢杆菌所降解，最典型的实例是把聚乙烯醇降解为乙酸盐，还能产生多种酶如木质素过氧化酶、漆酶、氨基比林-N-脱甲基酶、NADH-DCIP还原酶和孔雀绿还原酶等。可见，侧孢短芽孢杆菌具备开发成为防治昆虫、线虫、软体动物和植物病原菌的生防菌剂的特性。同时，其解磷、解钾及其对化学农药等物质的生物降解特性，使其具有土壤生物修复的能力。