[发明专利]一种卡芬太尼和卡芬太尼代谢物的检测方法

说明书

本发明涉及毒品检测技术领域，提供了一种卡芬太尼和卡芬太尼代谢物的检测方法。本发明通过对卡芬太尼大鼠体内代谢研究，确证卡芬太尼代谢物为吸毒后主要检测生物标志物，建立了卡芬太尼和卡芬太尼代谢物的快速灵敏检测方法，可指导人用吸毒检测。本发明提供的卡芬太尼和卡芬太尼代谢物的检测方法检出限较低，其中卡芬太尼的检出限为0.20ng/mL，卡芬太尼代谢物的检出限为0.01ng/mL。而且，本发明提供的方法可在大鼠尾静脉注射卡芬太尼50μg/kg后七天，在大鼠尿液中仍可检测到一定浓度的卡芬太尼代谢物，说明本发明提供的方法灵敏度较高，可指导人用吸毒检测。

技术领域

本发明涉及毒品检测技术领域，尤其涉及一种卡芬太尼和卡芬太尼代谢物的检测方法。

背景技术

卡芬太尼是一种超强力合成阿片类镇痛药，与原型药芬太尼同属一类。目前，人们对人体药理学、毒理学或生物样品中卡芬太尼的分析知之甚少。虽然卡芬太尼未用于人类临床医学，但是卡芬太尼作为兽药用于大型动物镇静，具有较好的效果，比吗啡的镇痛强10000倍。卡芬太尼是EC50最低的芬太尼类似物，卡芬太尼可能的作用机制是其具有高亲油性、易于通过血脑屏障(BBB)、受体功效高、能够高选择性和特异性结合μ-opioid受体，μ-opioid受体产生阿片类药物的效果，如镇痛和兴奋，然而卡芬太尼也具有副作用和潜在毒性，如肌肉僵硬、呼吸衰竭和呼吸暂停。

近年来，芬太尼的致死率逐年上升，引发严重的安全问题，其中卡芬太尼迅速蔓延，成为新一代街头毒王，而且卡芬太尼是EC50最低的芬太尼类似物。由于卡芬太尼吸食剂量极低，卡芬太尼在体内吸食后的检测成为监控的难点。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种卡芬太尼和卡芬太尼代谢物的检测方法，本发明提供的方法能够灵敏、准确地检测出待测样品中的卡芬太尼和卡芬太尼代谢物，可以用于指导人用吸毒检测。

本发明提供了一种卡芬太尼和卡芬太尼代谢物的检测方法，包括以下步骤：

(1)对待测样品进行固相萃取，得到前处理样品，所述固相萃取包括以下步骤：

(a)依次采用甲醇和磷酸盐缓冲溶液对萃取柱进行活化平衡处理；

(b)将待测样品、磷酸盐缓冲溶液和内标工作液混合，得到待测液，然后将待测液上样；

(c)依次采用甲酸水溶液和甲醇水溶液对萃取柱进行清洗，然后采用氨水和甲醇的混合溶液进行洗脱，得到洗脱液；

(d)将洗脱液浓缩后，再用甲醇水溶液复溶，离心取上清液，得到前处理样品；

(2)将前处理样品进行液相色谱-串联质谱检测，分别测试得到卡芬太尼峰面积和卡芬太尼代谢物峰面积，根据卡芬太尼浓度-峰面积标准曲线以及卡芬太尼代谢物浓度-峰面积标准曲线，得到待测样品中卡芬太尼和卡芬太尼代谢物的质量含量；

所述液相色谱-串联质谱的色谱条件包括：

流动相包括流动相A和流动相B；所述流动相A为甲酸水溶液，所述甲酸水溶液中甲酸的体积分数为0.05～0.2％；所述流动相B为甲酸甲醇溶液，所述甲酸甲醇溶液中甲酸的体积分数为0.05～0.2％；

所述洗脱方式采用梯度洗脱，所述梯度洗脱程序如表1所示：

表1梯度洗脱程序

所述液相色谱-串联质谱的质谱条件包括：

采用三重四级杆串联质谱；毛细管电压3000～4000V；毛细管温度为200～350℃；干燥气流速为5～10L/min；雾化气电压20～30psi。

优选的，所述步骤(a)磷酸盐缓冲溶液的pH值为6，所述甲醇和磷酸盐缓冲溶液的体积比为1:1；所述萃取柱为Waters Oasis PRiME MCX柱。