[发明专利]JOSD2蛋白在制备治疗恶性肿瘤药物中的应用

说明书

本发明提供JOSD2蛋白在制备治疗恶性肿瘤药物中的应用，所述JOSD2蛋白的序列如SEQ ID No：1所示。本发明实验证明JOSD2高表达的恶性肿瘤患者生存期显著低于低表达的患者，且在癌组织中的表达明显特异性高于正常组织；而在癌细胞中敲低JOSD2蛋白可显著抑制癌细胞的增殖和平板克隆形成能力；此外，在癌细胞中敲低JOSD2蛋白可完全抑制癌细胞体内移植瘤形成能力。本发明可制备诊断恶性肿瘤和预测恶性肿瘤预后的产品和JOSD2 siRNA以及JOSD2抑制剂，可作为诊断恶性肿瘤及预测恶性肿瘤预后的特异标志蛋白，使恶性肿瘤诊断更加准确和快速，为防治恶性肿瘤提供新的靶点治疗有效新药。

技术领域

本发明属于生物制药领域，涉及一个蛋白的应用，尤其涉及一种JOSD2蛋白在制备治疗恶性肿瘤药物中的应用。

背景技术

恶性肿瘤严重威胁人类健康和生命。其中肺癌等是全球发病率和致死率最高的恶性肿瘤。近年来，针对肺癌等的靶向治疗获得一定进展，围绕EGFR、EML-ALK、MET等分子靶点研发的药物已成功使部分肺癌患者获益，然而这一比例仅为20-30％左右。大部分(约70-80％)肺癌等患者因上述靶点未被激活，无法使用吉非替尼、克唑替尼等分子靶向药物，导致治疗失败。而免疫检查点抑制剂虽已获批用于晚期肺癌的治疗，但客观缓解率仅为10-20％，仍有大量患者无法从中获益。这些数据说明，寻找促进肺癌等癌细胞异常增殖的新分子靶点与信号通路，并基于该靶点和信号通路研究肺癌治疗的新方法和新手段，是目前肺癌治疗药物研究的热点和难点问题。

人JOSD2蛋白是由JOSD2基因(Genebank No.NM 001270639.1)编码而来，目前只清楚该蛋白属于去泛素化酶的MJDs(Machado-Joseph domain proteases)家族成员之一。目前该蛋白的功能几乎未被探索，其生理学功能及在肺癌等恶性肿瘤发生发展过程中发挥的作用均不明确。

发明内容

本发明的目的是提供一种JOSD2蛋白在制备治疗恶性肿瘤药物中的应用，该JOSD2蛋白的序列如SEQ ID No：1所示，所述恶性肿瘤由JOSD2高表达所致。所述恶性肿瘤包括肺癌、肝癌、胆管癌等JOSD2高表达的实体癌。

所述治疗恶性肿瘤的药物包括：通过RNA干扰抑制JOSD2基因表达的双链核糖核酸，或用于抑制JOSD2蛋白活性的蛋白质，或用于抑制JOSD2蛋白功能的小分子化合物。

本发明的另一个目的是提供一种JOSD2蛋白在制备诊断恶性肿瘤和预测恶性肿瘤预后的产品中的应用。所述JOSD2蛋白的序列如SEQ ID No：1所示，所述产品包括：用RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或基因芯片诊断恶性肿瘤和预测恶性肿瘤预后的产品，尤其制备恶性肿瘤的诊断和预测恶性肿瘤预后试剂盒。JOSD2可作为恶性肿瘤诊断的标记分子，所述恶性肿瘤由JOSD2高表达所致。所述恶性肿瘤包括肺癌、肝癌、胆管癌等JOSD2高表达的实体癌。本发明提高恶性肿瘤诊断和预测恶性肿瘤预后的准确性，基于JOSD2的检测，制备诊断试剂盒。

在本发明中，所述用免疫检测诊断恶性肿瘤和预测恶性肿瘤预后的产品包括：与JOSD2蛋白特异性结合的抗体。

所述用RT-PCR诊断恶性肿瘤和预测恶性肿瘤预后的产品至少包括一对特异性扩增JOSD2基因的引物。如正向引物：5’-ATGTCCCAGGCCCCG-3’(SEQ ID No：2)；反向引物：5’-AGCTGGCTGCGGACAGACTGA-3’(SEQ ID No：3)。

所述用实时定量PCR诊断恶性肿瘤和预测恶性肿瘤预后的产品至少包括一对特异性扩增JOSD2基因的引物。如正向引物：5’-CCCACCGTGTACCACGAAC-3’(SEQ ID No：4)；反向引物：5’-CTCCTGGCTAAAGAGCTGCTG-3’(SEQ ID No：5)。